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60224ES Hygromycin B(50 mg/mL) 潮霉素B(50 mg/mL)

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企業(yè)簡介

翌圣生物科技(上海)股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質(zhì)改造和酶進化技術(shù)為驅(qū)動,聚焦生命科學產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料,從事分子、蛋白和細胞三大品類生物試劑的研發(fā)、生產(chǎn)與銷售的高新技術(shù)企業(yè),通過打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術(shù)開發(fā)路徑,成為國內(nèi)少數(shù)同時覆蓋三大品類生物試劑、兼?zhèn)浜诵募夹g(shù)自主研發(fā)能力和規(guī)模化生產(chǎn)能力的高新技術(shù)企業(yè),產(chǎn)品廣泛應用于生命科學研究領(lǐng)域、診斷與檢測領(lǐng)域和生物醫(yī)藥領(lǐng)域。



主營業(yè)務


公司憑借在蛋白質(zhì)改造和酶進化領(lǐng)域的技術(shù)優(yōu)勢和深耕生物試劑行業(yè)多年積累的豐富經(jīng)驗,構(gòu)建了品質(zhì)優(yōu)良、類型齊全、種類豐富的產(chǎn)品管線。自公司成立以來,公司研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的生物試劑超過3000種,涵蓋分子、蛋白、細胞三大品類的生物試劑,能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購需求。公司核心產(chǎn)品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉(zhuǎn)錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉(zhuǎn)錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細胞分析系列、細胞培養(yǎng)系列、細胞轉(zhuǎn)染系列、報告基因檢測系列等多個品類的生物試劑,廣泛應用于生命科學研究、診斷檢測和生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。

發(fā)展歷程



榮譽資質(zhì)


翌圣生物通過申請商標和軟件著作權(quán)的方式保障核心技術(shù)和市場競爭力,不斷加強公司品牌建設(shè)。截至2022年3月31日,公司已經(jīng)獲得授權(quán)18項(其中發(fā)明14項、實用新型1項、外觀設(shè)計3項)和45項與生物試劑相關(guān)的軟件著作權(quán),擁有經(jīng)國家知識產(chǎn)權(quán)局商標局核準的注冊商標權(quán)37項以及4項境外注冊商標,是國家高新技術(shù)企業(yè)和上海市專精特新企業(yè)。

榮譽風.jpg


創(chuàng)新平臺


經(jīng)過多年的產(chǎn)品研發(fā)技術(shù)經(jīng)驗的沉淀以及持續(xù)的研發(fā)創(chuàng)新,翌圣生物積極開展“產(chǎn)學研”合作,與擁有生物催化與酶領(lǐng)域國家重點實驗室的湖北大學、擁有教育部工業(yè)生物領(lǐng)域重點研究基地的江南大學展開合作,優(yōu)化生物試劑關(guān)鍵原料的生產(chǎn)和表達工藝。翌圣生物以基因工程技術(shù)、生物信息技術(shù)、細胞生物學技術(shù)、免疫學技術(shù)、生化分析技術(shù)等生命科學領(lǐng)域的共性生物技術(shù)為基礎(chǔ),建立了六大核心技術(shù)平臺——雙向分子酶理性設(shè)計與定向進化平臺、密度發(fā)酵與超潔凈純化平臺、分子診斷試劑關(guān)鍵原料研發(fā)平臺、高通量測序建庫試劑創(chuàng)新研發(fā)平臺、高性能單克隆抗體研發(fā)平臺和mRNA醫(yī)藥應用研發(fā)平臺,目前已經(jīng)自主研發(fā)出20項核心技術(shù),打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術(shù)開發(fā)路徑,覆蓋技術(shù)研發(fā)、產(chǎn)品升級、規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制等生物試劑研發(fā)和生產(chǎn)的各關(guān)鍵環(huán)節(jié)。


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工業(yè)化生產(chǎn)


翌圣生物擁有按照準GMP 標準建設(shè)運營的工業(yè)化生產(chǎn)基地,配有噸級發(fā)酵線、工業(yè)級 AKTA 純化線和全自動包裝線。同時,公司通過了ISO 13485:2016質(zhì)量管理體系認證,從原料控制、生產(chǎn)管理、質(zhì)檢管控、倉儲運輸?shù)葘ιa(chǎn)線進行360度管理監(jiān)督,保證產(chǎn)品過程的可控制性及可追溯性,竭盡全力為您提供可靠的產(chǎn)品。

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客戶服務


翌圣生物憑借優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量、高效及時的響應能力、快速穩(wěn)定的交付能力和周到完備的售后服務獲得了眾多科研用戶和工業(yè)用戶的認可,為檢測公司、治療公司、工具類公司和科學研究實驗室提供應用于科學研究、體外診斷、基因測序、生物醫(yī)藥等的生物試劑。與中國科學院、清華大學、北京大學、復旦大學、上海交通大學、浙江大學等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫(yī)藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業(yè)客戶建立了穩(wěn)定、緊密的合作關(guān)系,公司產(chǎn)品被多次使用在Nature、Science、Cell等國際頂級期刊論文發(fā)表中。

圖片222.jpg

公司企業(yè)文化



使命

幫助客戶創(chuàng)造價值,讓世界更健康更快樂

愿景

成為生命科學工具領(lǐng)域全球Top⑩
具備驅(qū)動產(chǎn)業(yè)變革的技術(shù)創(chuàng)新能力
擁有一支持續(xù)學習型的翌圣鐵軍


價值觀


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翌圣生物始終秉承“幫助客戶創(chuàng)造價值,讓世界更健康更快樂”的使命,專注于技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品升級,不斷拓展核心技術(shù)的應用領(lǐng)域,為客戶提供更為的產(chǎn)品與服務,助力我國打造自主可控的生物試劑產(chǎn)業(yè)鏈。同時,翌圣生物將進一步推進國際化戰(zhàn)略,繼續(xù)布局和拓展海外市場,為全球生物試劑產(chǎn)業(yè)發(fā)展貢獻力量。










分子生物學試劑,細胞生物學試劑,免疫學試劑,蛋白組學試劑等

供貨周期 現(xiàn)貨 應用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,制藥

產(chǎn)品簡介

 

潮霉素B(Hygromycin B)是由吸水鏈霉菌(Streptomyces hygroscopicus)代謝產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素,通過干擾70S核糖體易位和誘導對mRNA模板的錯讀而抑制蛋白合成,從而殺死原核(如細菌)、真核(如酵母菌,真菌)和高等哺乳動物真核細胞。

大腸桿菌( Escherichia coli.)來源的潮霉素抗性基因(hyg或hph),編碼潮霉素B磷酸轉(zhuǎn)移酶,將潮霉素B轉(zhuǎn)化成不具有生物活性的磷酸化產(chǎn)物,從而起到解毒作用。針對這一原理,潮霉素B是一種非常有用的選擇性標記,用來篩選和維持培養(yǎng)成功轉(zhuǎn)染潮霉素抗性基因的原核或者真核細胞。另外,由于作用模式的差異,常與G418 (GeneticinTM),Zeocin™ 和Blasticidin S聯(lián)合使用進行雙抗性陽性細胞株的選擇。潮霉素B還能用作抗病毒劑,因其選擇性滲透進入因病毒感染增強通透性的細胞,且具有抑制翻譯的功效。還可混合入動物飼料中起到驅(qū)蟲功能。

本品是無菌的潮霉素B溶液(50 mg/mL in PBS buffer),可直接用培養(yǎng)液稀釋使用。

 

產(chǎn)品信息

 

貨號

60224ES03 / 60224ES10

規(guī)格

1 g (20 mL)/10×1g(20mL) 

CAS號(CAS NO.)

31282-04-9

分子式(Molecular Fomular)

C20H37N3O13

分子量(Molecular Weight)

527.52 g/mol

純度(Purity)

90% by HPLC

結(jié)構(gòu)(Structure)

 

組分信息

 

 

組分名稱

60224ES03

60224ES10

規(guī)格

1 g (20 mL)

10×1g (20mL) 

 

儲存條件

 

2~8℃保存,避免反復凍融。有效期2年。

 

使用說明

 

1. 常用篩選濃度

潮霉素B用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型、培養(yǎng)基、生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000 μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500 μg/mL;細菌/植物細胞20-200 μg/mL;真菌300-1000 μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜?!咀ⅰ浚簩τ谛枰呙芏葋頇z測活力的細胞,可增加接種量。

2)根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000 μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/mL,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

終濃度(μg/mL)

培養(yǎng)基體積(mL)

5 mg/mL潮霉素B加入體積(mL)

50

9.9

0.1

100

9.8

0.2

250

9.5

0.5

500

9.0

1.0

750

8.5

1.5

1000

8.0

2.0b

3)第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1)轉(zhuǎn)染48 h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)?!咀ⅰ浚杭毎幱诨钴S分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,將細胞稀釋至豐度不超過25%。

2)每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35 mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

 

注意事項

 

1. 潮霉素B的抗性基因(hyg或hph)除了來自E. Coli.外,還發(fā)現(xiàn)于其他的菌株,包括Streptomyces hygroscopicus和Klebsiella pneumoniae。

2. 本品為有毒化合物,避免與皮膚和眼睛接觸,請小心操作。

3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

4. 本產(chǎn)品僅用于科研用途,禁止用于人身上。

 




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