為解決病原檢測背景菌及宿主核酸殘留干擾問題，翌圣生物開發(fā)超低殘留去除技術(shù)，建立了遵循GMP標(biāo)準(zhǔn)的超潔凈分子酶生產(chǎn)基地-UCF.ME，以及嚴(yán)格按照ISO13485質(zhì)量管理體系進(jìn)行各環(huán)節(jié)把關(guān)，嚴(yán)控人（人員）、機(jī)（機(jī)器）、料（試劑、耗材）、法（工藝）、環(huán)（環(huán)境）、測（標(biāo)準(zhǔn)），有效的技術(shù)手段、潔凈的生產(chǎn)環(huán)境和嚴(yán)格的質(zhì)量控制結(jié)合，目前已實(shí)現(xiàn)多種UCF.ME®超低殘留分子酶的規(guī)?；a(chǎn)。

Hieff Unicon® Pure Pro U+ qPCR Mix（One Tube）（Cat#16713ES）是翌圣生物精心打造的一款低宿主DNA殘留的全預(yù)混通用qPCR mix預(yù)混液，該產(chǎn)品是基于全新3代通用全預(yù)混qPCR預(yù)混液（Cat#16713ES）對宿主（E. coli）基因組DNA殘留進(jìn)行有效控制，且同時控制了銅綠和人源常見病原菌殘留水平。因?yàn)楸绢A(yù)混液（Cat#16713ES）不僅有效控制了病原菌殘留水平，同時解決了多重檢測穩(wěn)定性影響以及靶標(biāo)通用性的痛點(diǎn)，提升了試劑的靈敏度特異性等關(guān)鍵性能。顯著提高檢測效率，可廣泛用于病原微生物檢測等應(yīng)用場景。

• 背景殘留低——大腸、銅綠及人源基因組DNA殘留48孔無檢出

• 全預(yù)混穩(wěn)定性——37℃可放置14天，4℃可放置28天，反復(fù)凍融50次性能穩(wěn)定

• 試劑通用性好——適配多類型多重引探（已驗(yàn)證超40種不同類型靶標(biāo)），具有優(yōu)秀的擴(kuò)增性能

• 靈敏度高特異性好——靈敏度可檢測到250 copies/mL，特異性48孔陰性不起峰

• 支持快速程序——兼容快速程序，30min即可出結(jié)果

• dUTP/UDG防污染體系——引入了dUTP/UDG防污染系統(tǒng)，可有效防止氣溶膠污染

• 多平臺多體系適用—— Bio-Rad CFX96、ABI Q5、7500、Slan、天隆等均適配

基于試劑背景菌殘留水平考察，使用翌圣超低殘留通用全預(yù)混qPCR預(yù)混液（Cat#16713ES）和常規(guī)試劑（無殘留控制）在大腸桿菌(E.coli)體系下進(jìn)行NTC擴(kuò)增，16713ES同時在銅綠及人源基因組DNA雙體系下進(jìn)行NTC擴(kuò)增，結(jié)果表明：Cat#16713ES在48孔NTC中均無檢出，試劑中背景DNA（大腸、銅綠和人源）殘留量極低。

基于全預(yù)混試劑穩(wěn)定性考察，對Cat#16713ES分別進(jìn)行三種方式處理(4℃、37℃以及凍融)。實(shí)驗(yàn)組于4℃、37℃分別處理7天，凍融50次，與對照組(-20℃保存)在4組多重?cái)U(kuò)增體系（組1、組2及組4為4重?cái)U(kuò)增體系，組3為3重?cái)U(kuò)增體系）下進(jìn)行穩(wěn)定性測評，且部分?jǐn)U增組增加了37℃加速14天的穩(wěn)定性測評。結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)組與對照組試劑的Ct值偏差(△Ct值)在±0.5以內(nèi)，熒光值偏差在15%以內(nèi)，翌圣全預(yù)混試劑具有優(yōu)秀的多重?cái)U(kuò)增穩(wěn)定性能。

基于試劑的多應(yīng)用場景考察，使用翌圣（Cat#16713ES）與多個常規(guī)試劑在不同靶標(biāo)下進(jìn)行擴(kuò)增性能驗(yàn)證。結(jié)果表明，本產(chǎn)品在病原、人源以及植物等多種類靶標(biāo)均有良好擴(kuò)增性能，試劑通用性好。

基于試劑靈敏度考察，對Cat#16713ES在超低濃度（250 copies/mL）樣本下進(jìn)行多重體系（4重）擴(kuò)增檢出率評價。結(jié)果表明，翌圣Cat#16713ES具有優(yōu)秀的擴(kuò)增靈敏度，檢出限至少可達(dá)250 copies/mL。

基于試劑快速程序的擴(kuò)增性能考察，在同一臺定量PCR儀(ABI Q5)上對7個梯度樣本(1~10^6 copies/μL)進(jìn)行常規(guī)程序(1h6min)和快速程序(30min)的驗(yàn)證。結(jié)果證明：快速程序的擴(kuò)增效率仍高達(dá)99%以上，且常規(guī)程序與快速程序的Ct值偏差(△Ct值)在±0.5以內(nèi)，熒光值偏差在±10%以內(nèi)，擴(kuò)增曲線呈“S”型。

翌圣生物作為生命科學(xué)工具供應(yīng)商，長期為IVD企業(yè)提供高品質(zhì)、高性價比的原料，除全預(yù)混qPCR/RT-qPCR預(yù)混液，還有更多各類qPCR/RT-qPCR檢測試劑，助力下游企業(yè)客戶共同解決人類病原及動物疫病的高效檢測。