PeproTech高品質(zhì)細(xì)胞因子及蛋白生產(chǎn)商
Peporech公司于1988年創(chuàng)立于美國新新澤西州，經(jīng)過26年的發(fā)展已成為世jie上zui大的重組細(xì)胞因子和蛋白、相關(guān)抗體及ELISA試劑盒。
Peporech公司是高品質(zhì)細(xì)胞因子生產(chǎn)商，產(chǎn)品包括原核和真核細(xì)胞表達(dá)的高質(zhì)量的重組蛋白，單克隆/多克隆抗體，酶聯(lián)免疫吸附開發(fā)試劑盒，相關(guān)培養(yǎng)基等
Peporech公司已經(jīng)開發(fā)出2000多種產(chǎn)品，其精良的技術(shù)保證了產(chǎn)品的高質(zhì)量，可靠性和穩(wěn)定性。
Peporech產(chǎn)品具有很高的性價(jià)比，在世界上眾多高水平的實(shí)驗(yàn)室和研究機(jī)構(gòu)中廣泛使用。截至2013年底，已被13000篇SCT文獻(xiàn)使用。
Peporech產(chǎn)品主要領(lǐng)域：
l 重組細(xì)胞因子和蛋白
l 單克隆和多克隆抗體
l ELISA試劑盒
l 無動(dòng)物成分（Animal Free）的重組細(xì)胞因子和蛋白
l GMP級(jí)別的重組細(xì)胞因子和蛋白
l 人胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基
實(shí)驗(yàn)方案 - Western Transfer （iBlot2 Dry Blot）
1. 打開 iBlot2 設(shè)備的蓋子。
2. 使用套件 #IB23001 （Thermo Fisher） 解開頂部和底部堆棧的密封。將堆棧放在塑料托盤中。（一個(gè)托盤可以容納兩個(gè) 4-20% Tris-Gly 凝膠）
3. 將堆棧放在 iBlot2 轉(zhuǎn)印機(jī)上，確保堆棧中的電氣觸點(diǎn)與 iBlot2 系統(tǒng)左側(cè)的觸點(diǎn)對(duì)齊。
4. 小心地從包含頂部陰極部分的堆棧中取出頂部部分，并將其放在一邊。
5. 將預(yù)運(yùn)行凝膠放在轉(zhuǎn)印膜上，確保凝膠標(biāo)記物朝向您，并使用印跡輥去除所有氣泡。
6. 將預(yù)浸泡（在去離子水中）的 iBlot 濾紙放在預(yù)運(yùn)行凝膠上，并使用轉(zhuǎn)印輥去除氣泡。
7. 將陰極堆棧放在預(yù)浸泡的濾紙上，電極面朝上，凝膠面朝下。使用印跡輥去除氣泡。
8. 將吸收墊放在陰極堆棧的頂部，金屬觸點(diǎn)位于左側(cè)，確保其與系統(tǒng)接觸點(diǎn)對(duì)齊。
9. 蓋上蓋子。觸摸屏幕上的 P3，然后開始，它將運(yùn)行 7 分鐘。
10. 一旦 iBlot2 發(fā)出嗶嗶聲，表示循環(huán)完成，請(qǐng)打開 iBlot2 設(shè)備的蓋子。
11. 丟棄一次性海綿和陰極堆棧。
12. 小心地取下并丟棄濾紙。使用凝膠作為標(biāo)記，并使用剃須刀將轉(zhuǎn)移膜切成兩半。
13. 丟棄凝膠并從堆棧中取出轉(zhuǎn)印膜。取下膜進(jìn)行測(cè)試后，丟棄陽極堆棧。
14. 將膜在封閉溶液（所有抗體為 10% Seablock）中孵育 40 分鐘，在軌道振蕩器上輕輕攪拌。
15.在軌道振蕩器上的干凈托盤中用TBST（TBS，pH 7.2,0.1%TWEEN-20）洗滌膜三次;每次洗滌持續(xù) 5-10 分鐘。
16.將TBST中的探測(cè)（一）抗體稀釋至50ml的體積（約0.20μg/ml），并在室溫下將膜在抗體溶液中孵育1-4小時(shí)。（最佳孵育時(shí)間取決于抗體/抗原結(jié)合親和力，并且必須預(yù)先確定每種抗體。
17. 按照步驟 #15 洗滌膜三次。
18. 根據(jù)制造商的規(guī)格稀釋 TBST 中的二抗。將膜在含有 50ml 稀釋二抗的干凈托盤中在室溫下在軌道振蕩器上孵育一小時(shí)。
19. 按照步驟 #15 洗滌膜三次。
20. 顯色需要使用市售的（例如 Bio-Rad 或 Sigma）堿性磷酸酶偶聯(lián)底物試劑盒。請(qǐng)按照制造商的說明進(jìn)行操作。
21. 條帶變得清晰可見后，將膜放入裝有 diH2O 的托盤中至少 10 分鐘，以停止顏色。
推薦材料：
SDS-PAGE 儀器及配件
iBlot2 干轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)系統(tǒng)
iBlot2 NC 常規(guī)膜組
Seablock
1xTBST
抗原特異性探測(cè)抗體（一抗）
二抗（與堿性磷酸酶偶聯(lián)的驢抗探測(cè)抗體種類）
市售堿性磷酸酶偶聯(lián)底物試劑盒
以下是Peporech公司熱銷產(chǎn)品：
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
Human EGF | AF-100-15-100 | 100ug |
Human IL-4 | 200-04-20 | 20ug |
Human TNF-alpha | 300-01A-10 | 10ug |
Human FGF-basic | 100-18B-50 | 50ug |
Human IFN-gamma | 300-02-100 | 100ug |
Human IL-1alpha | 200-01A-10 | 10ug |
Murine GM-CSF | 315-03-20 | 20ug |
Human FGF-basic | 100-18B-10 | 10ug |
Murine M-CSF | 315-02-10 | 10ug |
Human GM-CSF | 300-03-20 | 20ug |
Murine IL-4 | 214-14-20 | 20ug |
Human TNF-alpha | 300-01A-50 | 50ug |
Human TGF-β1 (HEK293 derived) | 100-21-10 | 10ug |
Murine IL-4 | 214-14-5 | 5ug |
Human IFN-gamma | 300-02-20 | 20ug |
Human IL-2 | 200-02-50 | 50ug |
Human TGF-β1 (HEK293 derived) | 100-21-2 | 2ug |
Human IL-2 | 200-02-10 | 10ug |
Human IL-1beta | 200-01B-10 | 10ug |
Human IL-4 | 200-04-5 | 5ug |
Human VEGF | 100-20-10 | 10ug |
Human IL-6 | 200-06-20 | 20ug |
Murine GM-CSF | 315-03-5 | 5ug |
Murine IFN-gamma | 315-05-20 | 20ug |
Human EGF | AF-100-15-500 | 500ug |
Human IL-6 | 200-06-5 | 5ug |
Human IL-15 | 200-15-10 | 10ug |
Human GM-CSF | 300-03-5 | 5ug |
Murine sRANK-Ligand | 315-11-10 | 10ug |
Human EGF | AF-100-15-1000 | 1000ug |
Human HGF | 100-39-10 | 10ug |
Murine SCF | 250-03-10 | 10ug |
Murine EGF | 315-09-100 | 100ug |
Murine IL-6 | 216-16-10 | 10ug |
Human IL-1beta | 200-01B-2 | 2ug |
Human SCF | 300-07-10 | 10ug |
Murine IL-3 | 213-13-10 | 10ug |
Human M-CSF | 300-25-10 | 10ug |
Human VEGF | 100-20-2 | 2ug |
Human TGF-beta1-Produced in CHO | 100-21C-10 | 10ug |
Murine TNF-alpha | 315-01A-5 | 5ug |
Murine TNF-alpha | 315-01A-20 | 20ug |
Murine IL-2 | 212-12-20 | 20ug |
Human IL-7 | 200-07-10 | 10ug |
Murine WNT-3A | 315-20-10 | 10ug |
Human IL-21 | 200-21-10 | 10ug |
Human FGF-basic | 100-18B-100 | 100ug |
Human IGF-I | 100-11-100 | 100ug |
Murine IL-2 | 212-12-5 | 5ug |
Human/Murine/Rat BMP-2 | 120-02-10 | 10ug |
