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瓊脂糖凝膠電泳
脂糖凝膠電泳原理
脂糖凝膠電泳的分析原理與其他支持物電泳最主要區(qū)別是:它兼有“分子篩"和“電泳"的雙重作用。
瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡結(jié)構(gòu),物質(zhì)分子通過時會受到阻力,大分子物質(zhì)在涌動時受到的阻力大,因此在凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量,而且還取決于分子大小,這就大大提高了分辨能力?,F(xiàn)廣泛應用于核酸的研究中。核酸會根據(jù)pH不同帶有不同電荷,在電場中受力大小不同,因此跑的速度不同,根據(jù)這個原理可將其分開。
實驗步驟
1.制膠:使用電泳緩沖液在制膠器上配制1.0%的瓊脂糖凝膠
2.混樣:2μL載樣緩沖液、 2μL 核酸熒光染料,10μLPCR產(chǎn)物混勻
3.點樣:將上步混好的樣10 μL加到凝膠孔中
4.電泳:90V電壓下電泳10~20min
結(jié)果展示
實驗周期及交付標準
1. 實驗周期:1-2周
2. 交付標準:引物序列、電泳圖、原始膠片、實驗報告(實驗步驟、試劑、儀器)
需確認信息
1、目的基因ID號及種屬
2、樣本類型(組織or細胞等)
3、樣本數(shù)量
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