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酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體 表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時(shí),受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到很高的敏感度。
實(shí)驗(yàn)步驟
1.將特異性抗體與固相載體 聯(lián)結(jié),形成固相抗體
2.加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng)
3.加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng)。
4.加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。
5.加底終止劑
6.酶標(biāo)儀檢測
結(jié)果展示
實(shí)驗(yàn)完成周期及交付標(biāo)準(zhǔn)
1. 實(shí)驗(yàn)周期:5個(gè)工作日
2. 交付標(biāo)準(zhǔn):ELISA檢測原始OD值、ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線、ELISA檢測目的蛋白濃度值、柱狀圖、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(實(shí)驗(yàn)步驟、試劑、儀器等)
需確認(rèn)的信息
1. 樣本的種屬及類型,是血清還是血漿
2. 樣本數(shù)為多少,是否需要做重復(fù)
3. 是否提供試劑盒,需要進(jìn)口試劑盒還是國產(chǎn)試劑盒
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