sigma試劑血清中缺少抗A、B血型抗原的抗體，常用于使免疫反應(yīng)降到。已經(jīng)證實(shí)，人AB血清可以提高多數(shù)人來(lái)源細(xì)胞生長(zhǎng)速率，并且使用濃度比混合型血清更低。更適用于細(xì)胞、組織器官培養(yǎng)、細(xì)胞株保藏、單抗研制。

1、sigma試劑血清來(lái)源 ：可從世界各地收集胎牛血清，但必須符合其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和美國(guó)農(nóng)業(yè)部進(jìn)口要求；

2、血清的收集：必須符合工業(yè)生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)，低溫采集，一次分離，分離后立即混合凍存；

3、血清的制備：超低IgG胎牛血清、透析血清、γ-射線輻照；

4、除菌過(guò)濾：0.22μm和0.1μm濾膜過(guò)濾；

5、成品分裝：根據(jù)需要分裝成不同規(guī)格。

牛血清的使用所產(chǎn)生的常見(jiàn)問(wèn)題

（一）由于血清營(yíng)養(yǎng)豐富，貯存條件特殊，因此在貯存和使用過(guò)程中容易產(chǎn)生以下問(wèn)題：

1、改變培養(yǎng)液的pH值

牛血清的pH理論值為7.0～8.0，培養(yǎng)基在加入規(guī)定量的試劑后（即達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的滲透壓），再加入10％的牛血清，一般會(huì)使培養(yǎng)液的pH值發(fā)生改變。因此在使用過(guò)程中應(yīng)注意pH的變化，如有必要可用1mol/L NaOH或1mol/L HCl調(diào)pH到所需值。

2、由于血清的營(yíng)養(yǎng)成分豐富，非常適合細(xì)菌、真菌和支原體等生長(zhǎng)。國(guó)產(chǎn)血清大部分采用手工分裝，因此容易把微生物帶入而使得血清被污染。使用前如果沒(méi)有及時(shí)發(fā)現(xiàn)，將會(huì)把污染物帶入正在培養(yǎng)的細(xì)胞中，而使得細(xì)胞不能正常生長(zhǎng)。

3、血清在貯存解凍過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生沉淀，這是由于血清中含有大量脂蛋白、纖維蛋白及多肽類物質(zhì)，在-15℃冷凍保存解凍后就會(huì)自然形成沉淀，隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)，沉淀量會(huì)增加。因此在融化血清時(shí)一般應(yīng)先在4℃放置使之解凍，然后放在室溫使血清*融化，以避免沉淀的增加。添加血清時(shí)應(yīng)避免把沉淀加入培養(yǎng)液，否則由于沉淀的存在會(huì)使得所培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量黑點(diǎn)，或者細(xì)胞表面將會(huì)覆蓋一層油狀物質(zhì)，影響細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。為減少血清的損失，可以把有沉淀的血清收集起來(lái)進(jìn)行離心處理，將上清液加入培養(yǎng)液使用（一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾）。

（二）大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)中牛血清對(duì)細(xì)胞及病毒滴度的影響

血清是一種成分復(fù)雜的混合物，不同批次血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的促進(jìn)作用不同。大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)中由血清引起的細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不佳及病毒滴度的影響表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：

1、細(xì)胞生長(zhǎng)速度緩慢，長(zhǎng)滿單層時(shí)間長(zhǎng)；從同一細(xì)胞瓶中分出兩瓶細(xì)胞，用同一種培養(yǎng)液，分別加入10％的對(duì)照血清和待檢血清，在相同條件下培養(yǎng)72小時(shí)，會(huì)出現(xiàn)對(duì)照血清長(zhǎng)滿單層，而待檢血清大約只有60～70％，這種血清就不適合用來(lái)大規(guī)模培養(yǎng)細(xì)胞。

2、細(xì)胞傳代后形態(tài)不正常，細(xì)胞狀態(tài)發(fā)生變化 ；由于血清的質(zhì)量問(wèn)題，使原本狀態(tài)正常的細(xì)胞經(jīng)傳代后形態(tài)會(huì)變差；比如：細(xì)胞瓶里會(huì)出現(xiàn)一些蠕動(dòng)的小黑點(diǎn)（并非污染），或者細(xì)胞表面形成一層油狀覆蓋物；細(xì)胞的輪廓變得模糊，細(xì)胞之間的間隙被血清中的蛋白顆粒填充，從而影響細(xì)胞向四周擴(kuò)展生長(zhǎng)。

3、細(xì)胞傳幾代后就出現(xiàn)脫壁現(xiàn)象，不能連續(xù)傳代 ；質(zhì)量較差的血清缺乏某種細(xì)胞的貼壁因子，會(huì)使細(xì)胞在傳代過(guò)程中逐漸喪失貼壁的能力。細(xì)胞會(huì)從正常的貼壁狀態(tài)，邊緣開始上翹。觀察到的現(xiàn)象就是細(xì)胞表面不光滑，晃動(dòng)細(xì)胞瓶會(huì)看到細(xì)胞表面有絮狀物隨培養(yǎng)液波動(dòng)。隨著傳代次數(shù)增加，細(xì)胞上翹的情況越來(lái)越嚴(yán)重，直到終*脫壁而死亡。

4、細(xì)胞長(zhǎng)的很好，致密的單層，狀態(tài)也很正常，但是接毒后細(xì)胞基本不發(fā)生病變，做滴度檢測(cè)幾乎測(cè)不出抗原滴度。這種情況也許是因?yàn)檠逯泻信c接種的病毒有同源的特異性抗體。比如血清中經(jīng)常會(huì)存在乙腦抗體，牛腹瀉病毒抗體等，如果存在這些抗體，就會(huì)把接進(jìn)去的病毒給中和掉。如果抗體滴度很高，病毒會(huì)被抗體*中和，就沒(méi)有毒顆粒在細(xì)胞中增殖，所以會(huì)檢測(cè)不到病毒滴度。這種情況給疫苗企業(yè)造成的損失是相當(dāng)大的，不產(chǎn)毒等于前面所做的那么多工作全部白費(fèi)，浪費(fèi)人力、物力，尤其是時(shí)間上的浪費(fèi)，從培養(yǎng)細(xì)胞開始到接病毒，到收液至少需要一兩個(gè)月，一旦出現(xiàn)不產(chǎn)毒的情況，那么這一兩月時(shí)間就白白浪費(fèi)掉了，這也是牛血清給疫苗企業(yè)造成的風(fēng)險(xiǎn)之一。

5、細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)一般，產(chǎn)毒少，毒價(jià)低。這種情況比較常見(jiàn)，細(xì)胞是病毒的載體，由于血清質(zhì)量不好，導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不好，病毒就無(wú)法進(jìn)行正常的復(fù)制。并非所有毒都不能復(fù)制，所以就造成疫苗的效價(jià)不夠，可能造成不合格產(chǎn)品。

看來(lái)一款血清直接關(guān)系細(xì)胞的生死存亡，不用擔(dān)心，上海素冉提供無(wú)支原體，低內(nèi)毒素和低血紅素的，無(wú)反復(fù)凍融的高品質(zhì)血清。