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- 公司名稱 青旗(上海)生物技術(shù)發(fā)展有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2022/7/19 15:54:40
- 訪問次數(shù) 2906
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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上海青旗生物科技有限公司是一批由美國留學(xué)歸來的致力于服務(wù)中國生物領(lǐng)域的青年創(chuàng)辦的一家新型公司。公司自創(chuàng)辦以來,以優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、快捷的速度和完善的售后服務(wù),贏得生物界老師的厚愛,您選擇青旗的理由: 產(chǎn)品齊全:囊括實驗室儀器、設(shè)備、實驗室耗材、免疫生物學(xué)試劑、動物生物學(xué)試劑、植物生物學(xué)試劑、微生物學(xué)試劑、細胞生物學(xué)試劑、遺傳學(xué)生物試劑、生物化學(xué)試劑、分子生物學(xué)試劑。 品牌齊全:囊括國內(nèi)外100多個知名品牌。 方便、快捷,訂貨周期短,選擇服務(wù)質(zhì)量好的快遞,全稱跟蹤,及時到達您的手中。青旗生物努力打造生物領(lǐng)域內(nèi)的京東商城。 平價:同等質(zhì)量的產(chǎn)品,我們這里價格實惠,為您節(jié)省每一分錢。 優(yōu)質(zhì)的售后服務(wù):實驗過程,我們有技術(shù)全程跟蹤指導(dǎo),若有問題,我們*時間為您處理,保證您售后無憂。 多姿多彩的技術(shù)服務(wù):免疫學(xué)技術(shù)服務(wù)、Western Blotting技術(shù)服務(wù)、實時熒光定量PCR(RealTime PCR)技術(shù)服務(wù)、病理學(xué)檢測技術(shù)服務(wù)等。 總之,青旗生物是您值得信賴的地方:誠實正直,以客戶的切身利益為出發(fā)點,關(guān)注客戶,協(xié)助客戶一起成長!
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細胞接收后的操作流程與注意事項:
1、如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決
2、貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)
3、生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
1、吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?-2min)
2、鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让福?-8ml*培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散
3、取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)?培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4、注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存
特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))
1、收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時)
2、貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)
3、如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室
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做細胞實驗的同學(xué)看過來。原裝ATCC細胞現(xiàn)貨來啦。
選擇上海青旗生物細胞有3個理由:
1、細胞狀態(tài)好,形態(tài)佳,易成活,是市面上比較好養(yǎng)的細胞之一;
2、物流迅速,復(fù)蘇好后發(fā)貨,次日就能到;
3、使用我司推薦的進口品牌血清進行培養(yǎng)實驗,效果更佳。
專業(yè)技術(shù)人員李工收藏的細胞培養(yǎng)小技巧:
1. 買細胞要去靠譜的地方買,比如 ATCC 或者青旗生物。一般上面會有針對細胞的介紹,這樣培養(yǎng)之前可以了解細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。
2. 不管是買的細胞,還是別人惠贈的細胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴增凍存,凍存細胞復(fù)蘇后第二天*更換一次培養(yǎng)基。
3. 發(fā)現(xiàn)細胞有污染迅速處理掉,特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時。細菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細胞會長的慢,可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。
4. 不同細胞生長周期不同。有的生長很快,比如說 MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿。這就需要要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索。
5. 對于嬌弱的細胞,就得細心呵護。胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間。每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況。記住,是每天。
細胞培養(yǎng)常見問題及解決方法
問題 | 原因 | 解決方案 |
細胞生長緩慢 | 生長培養(yǎng)基使用不當 | 按照生產(chǎn)商的建議,使用相應(yīng)的預(yù)熱生長培養(yǎng)基。 |
生長培養(yǎng)基中血清質(zhì)量差 | 使用其他批次血清。 | |
傳代操作不當 | 按照生產(chǎn)商的建議消化時間及傳代比例進行操作。 | |
換液過于頻繁 | 降低換液頻率,參考生產(chǎn)商推薦的換液頻率。 | |
細胞傳代次數(shù)過多 | 使用傳代次數(shù)較少的健康細胞。 | |
細胞生長超過匯合狀態(tài) | 哺乳動物細胞傳代應(yīng)在細胞處于對數(shù)期、未達到匯合狀態(tài)時進行,建議細胞密度達 80-90%傳代。 | |
細胞被支原體污染 | 將細胞、培養(yǎng)基和試劑丟棄;新取一只凍存細胞,并且使用新的培養(yǎng)基和試劑。 | |
細胞復(fù)蘇存活率低 | 細胞凍存不當 | 新取一只凍存細胞,并儲存在液氮中。將細胞儲存在液氮中,直至復(fù)蘇。 |
自行制備的凍存細胞無活性 | 將細胞按照生產(chǎn)商推薦的密度凍存。 | |
制備凍存細胞時使用傳代次數(shù)少的細胞。 | ||
嚴格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序凍存細胞。請注意本手冊推薦的冷凍程序是凍存細胞的一般流程,只能作為指導(dǎo)原則使用。 | ||
新取一只凍存細胞。 | ||
細胞復(fù)蘇方法不當 | 嚴格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序復(fù)蘇細胞。請注意本手冊推薦的解凍程序是復(fù)蘇細胞的一般流程,只能作為指導(dǎo)原則使用。 | |
確保冷凍細胞解凍迅速,接種前用預(yù)熱的生長培養(yǎng)基緩慢稀釋細胞。 | ||
復(fù)蘇培養(yǎng)基使用不當 | 使用生產(chǎn)商推薦的培養(yǎng)基。確保培養(yǎng)基使用前已經(jīng)預(yù)熱。 | |
細胞稀釋過度 | 按照生產(chǎn)商的建議,將解凍后的細胞高密度接種,以改善復(fù)蘇效果。 | |
處理細胞時動作不夠輕柔 | 凍存和復(fù)蘇過程對大多數(shù)細胞都會造成不利影 響。不要通過渦旋振蕩或者用力敲打培養(yǎng)瓶的方法使細胞脫落(培養(yǎng)昆蟲細胞時除外),也不要高速離心細胞。 | |
凍存液中所用保護劑在儲存過程中未避光 | 如果未避光儲存,凍存保護劑會轉(zhuǎn)變?yōu)閷毎卸拘缘奈镔|(zhì);新取一只凍存保護劑,重新凍存細胞。 |
★由于細胞庫現(xiàn)有細胞類目多,為了不出現(xiàn)混亂錯誤,需要了解相關(guān)細胞價格及詳細資料直接call,對您造成的不便還請見諒!
★注:如運輸過程中導(dǎo)致細胞污染或者死亡,我們將無條件補發(fā)
收貨后十個工作日內(nèi)有其他問題提供照片可半價重發(fā)
最后,通過低溫保藏儲備一些細胞,以防支原體大面積來襲。如果支原體有抬頭的跡象,或常規(guī)檢測呈陽性結(jié)果,那么較可靠的補救措施是扔掉所有培養(yǎng)物,清潔培養(yǎng)箱和超凈臺,一切從頭開始。當然,你得確保儲備的細胞是不含支原體的。