感恩回饋，價格實惠，物美價廉，量大從優(yōu)，部分產(chǎn)品贈送。。。。。。

 上海青旗生物科技有限公司是一批由美國留學(xué)歸來的致力于服務(wù)中國生物領(lǐng)域的青年創(chuàng)辦的一家新型公司。公司自創(chuàng)辦以來，以優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、快捷的速度和完善的售后服務(wù)，贏得生物界老師的厚愛，您選擇青旗的理由： 產(chǎn)品齊全：囊括實驗室儀器、設(shè)備、實驗室耗材、免疫生物學(xué)試劑、動物生物學(xué)試劑、植物生物學(xué)試劑、微生物學(xué)試劑、細(xì)胞生物學(xué)試劑、遺傳學(xué)生物試劑、生物化學(xué)試劑、分子生物學(xué)試劑。 品牌齊全：囊括國內(nèi)外100多個知名品牌。 方便、快捷，訂貨周期短，選擇服務(wù)質(zhì)量好的快遞，全稱跟蹤，及時到達(dá)您的手中。青旗生物努力打造生物領(lǐng)域內(nèi)的京東商城。 平價：同等質(zhì)量的產(chǎn)品，我們這里價格實惠，為您節(jié)省每一分錢。 優(yōu)質(zhì)的售后服務(wù)：實驗過程，我們有技術(shù)全程跟蹤指導(dǎo)，若有問題，我們*時間為您處理，保證您售后無憂。 多姿多彩的技術(shù)服務(wù)：免疫學(xué)技術(shù)服務(wù)、Western Blotting技術(shù)服務(wù)、實時熒光定量PCR(RealTime PCR)技術(shù)服務(wù)、病理學(xué)檢測技術(shù)服務(wù)等。 總之，青旗生物是您值得信賴的地方：誠實正直，以客戶的切身利益為出發(fā)點，關(guān)注客戶，協(xié)助客戶一起成長！

公司全部產(chǎn)品進(jìn)入。。。

細(xì)胞名稱：huh7細(xì)胞atcc|ATCC原代|ATCC細(xì)胞說明書

ATCC細(xì)胞的原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、凍存和復(fù)蘇實驗方法步驟
一、ATCC細(xì)胞  細(xì)胞凍存方法

主要操作步驟為：

（1）選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天*換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心（1000r/min，10分鐘）。

（2）去上清液，加入含20%小牛血清的*培養(yǎng)基，于4℃預(yù)冷15分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為3×106～1×107/mL之間。

（3）將上述細(xì)胞分裝于安瓿或冷凍塑料管中，安瓿裝1～1.5mL在火焰噴燈上封口，封口處要*封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記（日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù)）。

（4）將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi)；置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入4℃冰箱中2～3小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)3～4小時（此步可省略），再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時，蕞后沉入液氮中。

細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，*取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。

huh7細(xì)胞atcc|ATCC原代|ATCC細(xì)胞說明書

二、細(xì)胞的復(fù)蘇

一、細(xì)胞復(fù)蘇的原則

在實際操作中，凍存細(xì)胞要進(jìn)行復(fù)蘇，再培養(yǎng)傳代。復(fù)蘇細(xì)胞一般采用快速融化法。以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細(xì)胞內(nèi)，再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細(xì)胞。

二、細(xì)胞復(fù)蘇的主要操作步驟

(1)佩戴眼鏡和手套，從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。

(2)迅速放入38℃水浴中，并不時搖動，在1分鐘內(nèi)使其*融化，然后在無菌下取出細(xì)胞。

(3)在1000r/min速度下離心5～10分鐘，棄去上層液，加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中，接種濃度1×109/L，置37℃溫箱靜置培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)，觀察生長情況。

做細(xì)胞實驗的同學(xué)看過來。原裝ATCC細(xì)胞現(xiàn)貨來啦。 

選擇上海青旗生物細(xì)胞有3個理由：

1、細(xì)胞狀態(tài)好，形態(tài)佳，易成活，是市面上比較好養(yǎng)的細(xì)胞之一;

2、物流迅速，復(fù)蘇好后發(fā)貨，次日就能到;

3、使用我司推薦的進(jìn)口品牌血清進(jìn)行培養(yǎng)實驗，效果更佳。

專業(yè)技術(shù)人員李工收藏的細(xì)胞培養(yǎng)小技巧:

1. 買細(xì)胞要去靠譜的地方買，比如 ATCC 或者青旗生物。一般上面會有針對細(xì)胞的介紹，這樣培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。

2. 不管是買的細(xì)胞，還是別人惠贈的細(xì)胞，剛拿到手趕緊的做兩件事：檢測是否有支原體污染;迅速擴增凍存，凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天*更換一次培養(yǎng)基。

3. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時。細(xì)菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會長的慢，可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。

4. 不同細(xì)胞生長周期不同。有的生長很快，比如說 MDA-MB-231，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢，比如 BT474，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索。

5. 對于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)。胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間。每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況。記住，是每天。