H9C2轉染、大鼠心肌細胞--上海轉染生物ZetaLife

貼壁細胞質粒轉染步驟：

1、質粒提?。菏褂脽o內(nèi)毒素提取試劑盒

2、質粒溶解：溶于超純水或雙蒸水，一定不能溶于試劑盒Buffer等其他試劑

3、質粒熒光：若質粒不帶熒光、請使用熒光對照，方便查看轉染效率

4、質粒濃度：500-600ng/ul

5、質粒和轉染試劑復合物制備：取質粒8ug和轉染試劑8ul混合，吹打混勻室溫靜置15分鐘，無需另外加入任何試劑稀釋

6、細胞轉染前狀態(tài)：拍照片留存

7、貼壁細胞鋪板：6孔板*培養(yǎng)基2ml、培養(yǎng)基中不加雙抗，細胞密度：60%左右

8、轉染：將復合物加入輕搖混勻、培養(yǎng)箱培養(yǎng)

9、換液：轉染24小時后培養(yǎng)基換液

10、轉染效率：轉染48小時后拍熒光照片，查看轉染效率

11、轉染后細胞狀態(tài)：拍明場細胞狀態(tài)照片

12、檢測：總計轉染48小時后提取RNA或蛋白檢測

?ZetaLife Advanced DNA/RNA Transfection Reagent優(yōu)秀特點：

1、轉染效率高：新型高分子材料載量大、體積大小是脂質體的1/10、進入細胞能力強

2、無細胞毒性：進入細胞后可以被代謝成水和二氧化碳的轉染試劑

3、不激活細胞表面或細胞體內(nèi)marker，不激活細胞免疫機制

4、對細胞膜無物理性損傷，不易出現(xiàn)細胞變形、利于細胞保持較高活力

5、可反映真實的細胞通路蛋白原始數(shù)據(jù)

6、操作簡單：含血清*培養(yǎng)基轉染、無需4-6h換無需購買無血清培養(yǎng)

7、可高效率轉染siRNA到任何干細胞、免疫細胞、原代細胞、懸浮細胞及細胞系

上海轉染生物科技有限公司是服務于高校和科研院所生命科學研究、生物醫(yī)藥研發(fā)、生物制品生產(chǎn)、基因和細胞治療等領域高科技生物技術企業(yè)。提供的第三代高分子、細胞內(nèi)可代謝的轉染試劑，解決了難轉染細胞轉染效率低、脂質體轉染毒性大致細胞死亡多、需要無血清環(huán)境的這些問題，比如：RAW264.7、THP-1、精原干細胞、IPS細胞、BMDM、MT-4人淋巴T細胞、SW480、A549、U87細胞等；提供的活體動物可代謝體內(nèi)轉染試劑，可轉染長片段質粒DNA至體內(nèi) 可通過靜脈注射或體內(nèi)局部組織注射的簡單方式完成轉染過程; 提供的無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn)，培養(yǎng)間充質干細胞和多種免疫細胞系等，為制藥公司或者生物制品生產(chǎn)公司提供無血清的細胞規(guī)模生產(chǎn)支持；提供以植物生物為平臺基因序列人源化、細胞培養(yǎng)可分解的3D基質膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品等。

美國Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動物細胞、活體動物轉染的第三代高分子轉染試劑，此技術成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關鍵技術之一。