超臨界流體色譜法
以超臨界流體作為流動相的色譜技術(shù)被稱為超臨界流體色譜法。雖然超臨界流體色譜法20世紀(jì)60年代就出現(xiàn)了,但是直到21世紀(jì)才得到成功應(yīng)用。目前超臨界流體色譜法仍然是較新的色譜分析方法,很多人對它的了解不多,下面就簡單介紹一下它的特點與適用范圍。
超臨界流體色譜法與氣相色譜法以及高效液相色譜法的比較
超臨界流體色譜法主要用于分析可溶的多種化合物;其分離原理為CO2作為流動相通過改變色譜柱、壓力和溫度、添加有機助溶劑來調(diào)節(jié)分離;分析揮發(fā)性化合物時不需要衍生化。
氣相色譜法主要用于分析易揮發(fā)、難降解的化合物;其分離原理是通過改變色譜柱、溫度來調(diào)節(jié)分離;樣品需氣化才能分離,有時需要衍生化。
高效液相色譜法主要用于分析多種可溶的、加熱易降解的化合物;其分離原理是通過改變色譜柱、流動相和溫度來調(diào)節(jié)分離;有時需要衍生化。
超臨界流體色譜法和氣相色譜法、高效液相色譜法有不同的選擇性,可以和氣相色譜法、高效液相色譜法形成很好的互補。對于復(fù)雜體系樣品,超臨界流體色譜法結(jié)合其他的色譜分離手段可以更加完整的對樣品進行分析。
超臨界流體色譜法通常是一種正相技術(shù),因為組分按極性由低到高的程序運行。然而超臨界流體色譜法與正相HPLC相比具有顯著的優(yōu)勢,其平衡速度極快,重現(xiàn)性非常出色,甚至可以進行水性樣品分析。
超臨界流體色譜法的適用范圍
超臨界流體色譜法非常適合用于分離極性很低的化合物,例如許多天然產(chǎn)物。包括脂溶性維生素、脂溶性藥物雜質(zhì)、類胡蘿卜素和脂質(zhì)。對于此類樣品,常以C18作為固定相。在脂溶性化合物的分離上基本可以*代替正相色譜,并獲得更佳的分離效果。早期大多數(shù)應(yīng)用使用純CO2、壓力程序和火焰離子化檢測器(FID)。
超臨界流體色譜法是分離各種結(jié)構(gòu)類似物的較好選擇,例如各種手性藥物異構(gòu)體(包括手性藥物雜質(zhì)),位置異構(gòu)體、順反異構(gòu)體等。
超臨界流體色譜法可以分析揮發(fā)性化合物,特別是對于熱不穩(wěn)定的揮發(fā)性化合物,分析揮發(fā)性化合物時不需要衍生化,并且可以從分析放大到制備SFC,突破GC不能制備的瓶頸。
超臨界流體色譜法還在藥物代謝產(chǎn)物研究、中藥分析研究等方面獲得廣泛應(yīng)用。