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HRP酶標(biāo)二抗
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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HRP酶標(biāo)二抗是用于增強(qiáng)免疫學(xué)檢測(cè)信號(hào)的關(guān)鍵試劑,廣泛應(yīng)用于Western blot、ELISA、免疫沉淀和免疫組化等實(shí)驗(yàn)中
產(chǎn)品介紹

1. HRP酶標(biāo)二抗:產(chǎn)品概述

HRP 酶標(biāo)二抗(Horseradish Peroxidase-conjugated Secondary Antibody,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記二抗)是一種用于免疫學(xué)檢測(cè)的高效二級(jí)抗體,廣泛應(yīng)用于Western blot(蛋白質(zhì)印跡)、ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))、免疫沉淀(IP)和免疫組化(IHC)等實(shí)驗(yàn)中。HRP 酶標(biāo)二抗通過(guò)與一抗結(jié)合,利用辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的催化作用,在加入化學(xué)發(fā)光底物后產(chǎn)生強(qiáng)烈的發(fā)光信號(hào),從而實(shí)現(xiàn)目標(biāo)蛋白或抗原的高靈敏度檢測(cè)。

HRP 酶標(biāo)二抗兼具高特異性和高靈敏度,是實(shí)驗(yàn)室中常用的檢測(cè)工具。它能夠有效放大檢測(cè)信號(hào),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性,尤其適合要求高靈敏度的檢測(cè)。

2. HRP酶標(biāo)二抗:核心特性

2.1 酶標(biāo)功能

  • 辣根過(guò)氧化物酶(HRP):HRP是一種常用于生物檢測(cè)的酶,能夠催化多種底物(如TMB、DAB和ECL底物)發(fā)生氧化反應(yīng),生成可檢測(cè)的化學(xué)信號(hào)。通過(guò)與二抗結(jié)合,HRP能夠放大一抗與目標(biāo)抗原的結(jié)合信號(hào),實(shí)現(xiàn)高靈敏度的檢測(cè)。

2.2 高特異性

  • 特異性結(jié)合:HRP 酶標(biāo)二抗設(shè)計(jì)用于特異性識(shí)別并結(jié)合來(lái)源于不同物種的一抗。例如,抗兔HRP二抗可識(shí)別兔源一抗,而抗鼠HRP二抗則針對(duì)鼠源一抗。這種特異性結(jié)合確保了檢測(cè)的精確性和減少非特異性背景信號(hào)。

2.3 多種應(yīng)用適用性

  • 廣泛的實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:HRP 酶標(biāo)二抗適用于Western blot、ELISA、免疫沉淀和免疫組化等多種免疫學(xué)技術(shù)。其強(qiáng)大的信號(hào)放大能力使其成為各種實(shí)驗(yàn)中目標(biāo)分子檢測(cè)的理想工具。

3. 應(yīng)用領(lǐng)域

3.1 Western Blot(蛋白質(zhì)印跡)

在Western blot實(shí)驗(yàn)中,HRP 酶標(biāo)二抗用于檢測(cè)一抗結(jié)合的目標(biāo)蛋白。通過(guò)催化化學(xué)發(fā)光底物,HRP生成的光信號(hào)能夠被膠片或化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)捕捉,提供清晰的蛋白質(zhì)條帶,為蛋白質(zhì)表達(dá)分析提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。

3.2 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))

在ELISA實(shí)驗(yàn)中,HRP 酶標(biāo)二抗用于檢測(cè)與微孔板中固定抗原結(jié)合的一抗。加入底物后,HRP催化生成的信號(hào)通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定,從而實(shí)現(xiàn)抗原定量。HRP二抗在ELISA中常用于檢測(cè)血清中的抗體或抗原,適合大規(guī)模篩選和診斷研究。

3.3 免疫沉淀(IP)

HRP 酶標(biāo)二抗也可用于免疫沉淀實(shí)驗(yàn)中,檢測(cè)從細(xì)胞裂解液中富集的目標(biāo)蛋白質(zhì)。結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù),HRP 酶標(biāo)二抗能夠提供高靈敏度的蛋白質(zhì)相互作用分析。

3.4 免疫組化(IHC)

在免疫組化實(shí)驗(yàn)中,HRP 酶標(biāo)二抗用于檢測(cè)組織切片中的目標(biāo)抗原。通過(guò)DAB等底物的催化反應(yīng),生成的棕色沉淀物能夠在顯微鏡下清晰顯示目標(biāo)抗原的位置和表達(dá)模式,廣泛應(yīng)用于組織學(xué)和病理學(xué)研究中。

4. 使用方法

  1. 抗體稀釋:根據(jù)實(shí)驗(yàn)類型和樣品量,將HRP 酶標(biāo)二抗稀釋至合適的工作濃度。常規(guī)稀釋比例在1:1000至1:5000之間。建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化抗體濃度和孵育時(shí)間。

  2. 樣品孵育:在實(shí)驗(yàn)樣品上加入稀釋后的HRP 酶標(biāo)二抗,通常在室溫下孵育1小時(shí)。確保二抗與一抗充分結(jié)合,生成特異性信號(hào)。

  3. 檢測(cè)與顯色:加入適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)發(fā)光底物(如ECL)或顯色底物(如TMB或DAB),HRP酶催化反應(yīng)生成的信號(hào)通過(guò)酶標(biāo)儀、膠片或成像系統(tǒng)檢測(cè)和分析。

5. 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

5.1 信號(hào)放大能力

HRP 酶標(biāo)二抗通過(guò)催化化學(xué)底物產(chǎn)生強(qiáng)烈的光信號(hào),極大提高了檢測(cè)靈敏度,適合檢測(cè)低豐度的目標(biāo)蛋白或抗原,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

5.2 高特異性和低背景

HRP 酶標(biāo)二抗具有特異性,能夠準(zhǔn)確識(shí)別并結(jié)合一抗,減少非特異性背景信號(hào),確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性。

5.3 適應(yīng)性廣泛

HRP 酶標(biāo)二抗可應(yīng)用于Western blot、ELISA、免疫沉淀、免疫組化等多種免疫學(xué)技術(shù),是實(shí)驗(yàn)室日常研究和診斷中的理想選擇。

6. 注意事項(xiàng)

  • 儲(chǔ)存條件:HRP 酶標(biāo)二抗應(yīng)儲(chǔ)存在4°C的干燥環(huán)境中,以保持酶的活性。避免反復(fù)凍融,以免影響抗體性能。

  • 優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件:不同實(shí)驗(yàn)類型可能需要不同的抗體稀釋比例和孵育時(shí)間,建議在正式實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行小規(guī)模預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化抗體使用條件。

  • 底物選擇:根據(jù)檢測(cè)系統(tǒng)選擇合適的HRP底物,以獲得最佳的檢測(cè)信號(hào)。例如,ECL底物用于化學(xué)發(fā)光檢測(cè),而DAB則用于免疫組化中的顯色反應(yīng)。

7. 實(shí)驗(yàn)應(yīng)用實(shí)例

在癌癥研究中,研究人員通過(guò)Western blot使用HRP 酶標(biāo)二抗檢測(cè)癌癥標(biāo)志物的表達(dá)水平。使用ECL化學(xué)發(fā)光底物,成功在低表達(dá)水平的樣品中檢測(cè)到目標(biāo)蛋白,為后續(xù)的功能研究和臨床應(yīng)用提供了可靠的數(shù)據(jù)支持。

8. 總結(jié)

HRP 酶標(biāo)二抗是用于增強(qiáng)免疫學(xué)檢測(cè)信號(hào)的關(guān)鍵試劑,廣泛應(yīng)用于Western blot、ELISA、免疫沉淀和免疫組化等實(shí)驗(yàn)中。其信號(hào)放大能力、高特異性和廣泛的適應(yīng)性,使其成為實(shí)驗(yàn)室中工具,幫助研究人員實(shí)現(xiàn)高靈敏度的檢測(cè)和精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。無(wú)論是在基礎(chǔ)研究還是臨床診斷中,HRP 酶標(biāo)二抗都為各種生物檢測(cè)提供了強(qiáng)大的支持。




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