T細胞急性淋巴母細胞白血病相關(guān)抗原1抗體

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對靶蛋白的特異性。選擇針對不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導致不可靠且可能無法重現(xiàn)的結(jié)果。應注意選擇針對已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類似三級結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過程中添加到肽中，否則它們不會表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因為由于樣品處理過程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對它們產(chǎn)生的抗體可能無法識別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對于單克隆抗體尤其如此。

Tetraspanins are a group of hydrophobic membrane proteins that interact with a wide variety of proteins including intracellular signaling molecules, integrins and membrane receptors. TSPAN7 (tetraspanin 7), also known as

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1、制備抗原。

2、選擇實驗動物。

3、動物免疫。

4、試取血進行測試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實驗動物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對異種動物而言，是良好的抗原物質(zhì)?？梢源碳ぎ惙N動物產(chǎn)生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當提取后，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標記反應中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實驗動物 兔

4．其它材料及試劑