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【轉(zhuǎn)發(fā)】實時熒光定量PCR和梯度PCR 有什么區(qū)別?

時間:2024/4/10閱讀:758
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        梯度PCR是指你的PCR儀在設(shè)置的時候可以同一時間不同位置設(shè)置一個從高到低的溫度梯度,以便在不知道退火溫度的情況下選擇一個最適宜的退火溫度。

        二實時熒光定量PCR是通過再PCR過程中摻入熒光染料或釋放熒光基團,從而對模板進行相對定量或絕對定量的實驗,在實時熒光定量PCR時也可以設(shè)置梯度。

總的來說實時熒光定量PCR是一種實驗方法,而梯度PCR是一種實驗手段。


原理:

1、常規(guī)PCR 技術(shù):

對PCR 擴增反應(yīng)的終點產(chǎn)物進行定量和定性分析無法對起始模板準(zhǔn)確定量,無法對擴增反應(yīng)實時檢測。

2、實時定量PCR技術(shù):

利用熒光信號的變化實時檢PCR擴增反應(yīng)中一個循環(huán)擴增產(chǎn)物量的變化,通過Ct 值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的分析對起始模板進行定量分析


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