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產(chǎn)地類別 | 國(guó)產(chǎn) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 食品,農(nóng)業(yè) |
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1 β興奮劑ELISA檢測(cè)試劑盒原理及用途
本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)尿樣、組織、飼料等樣本中的β-興fen劑(beta-adrenergic,BAA),試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測(cè)時(shí),加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,樣本中的β-興fen劑和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗β-興fen劑抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含β-興fen劑含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中β-興fen劑的殘留量。
2 β興奮劑ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)指標(biāo)
2.1 試劑盒靈敏度:0.1ppb(ng/ml)
2.2 反應(yīng)模式:25℃,30min~15min
2.3 檢測(cè)下限:
尿液……………………………0.1ppb
組織……………………………0.4ppb
飼料……………………………1ppb
2.4 交叉反應(yīng)率:
鹽酸克倫特羅…………………100%
沙丁胺醇………………………80%
2.5 樣本回收率:
尿樣……………………………95%±10%
組織、飼料……………………85%±15%
3 試劑盒組成
酶標(biāo)板……………………………96孔
標(biāo)準(zhǔn)液:各1ml
0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb
高標(biāo)準(zhǔn)液(紅蓋):100ppb…………1ml
酶標(biāo)記物(紅蓋)……………………5.5ml
抗體工作液(藍(lán)蓋)…………………5.5ml
底物液A(白蓋)……………………6ml
底物液B(黑蓋)……………………6ml
終止液(黃蓋)………………………6ml
20×濃縮洗滌液(白蓋)……………40ml
10×復(fù)溶液(黃蓋)……………………50ml
說(shuō)明書(shū)…………………………………1份
蓋板膜…………………………………1張
自封袋…………………………………1個(gè)
酶聯(lián)免疫試驗(yàn)步驟
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會(huì)有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
1 編 號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
2 加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶標(biāo)記物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應(yīng)30分鐘。
3 洗 滌:小心揭開(kāi)蓋板膜,甩去孔內(nèi)液體,每孔加350ul工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,最后一次拍干(用吸水紙拍干,拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
4 顯 色:每孔加入底物液A 50µl,再加底物液B 50µl,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘。
5 終 止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。
6 測(cè)吸光值:用酶標(biāo)儀于450nm處測(cè)定每孔吸光度值(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm)。測(cè)定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。