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TRF 法:科研和臨床金標(biāo)準(zhǔn)
QPCR法: 操作簡(jiǎn)便,用時(shí)短,適用于批量檢測(cè)
TRF法檢測(cè)端粒長(zhǎng)度
TRF分析也稱作端粒的Southern印跡法,是應(yīng)用針對(duì)端粒重復(fù)序列的探針來檢測(cè)限制性酶切后所 保留的端粒的方法。
限制性酶會(huì)將基因組DNA消化為短的片段, 留下 大量完好的端粒,即所謂的端粒限制性片段。
以凝膠電泳分離基因組片段 ,通過放射性探針 (CCCTAA)。
QPCR法檢測(cè)端粒長(zhǎng)度
端粒為染色體末端GGGATT 6堿基 重復(fù)序列 ,設(shè)計(jì)PCR引物十分困難(二聚體不可避免) ,也無法設(shè)計(jì) Taqman探針
2002年 , Richard通過引物中引入 突變 ,減少二聚體的產(chǎn)生 ,成功利 用SYBR Green染料法測(cè)定端粒的相對(duì)長(zhǎng)度。
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