胞外多糖(EPS)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

檢測(cè)范圍：

0.4mg/L - 50mg/L

使用目的：

本試劑盒用于測(cè)定微生物樣本中胞外多糖(EPS)含量。

實(shí)驗(yàn)原理

中胞外多糖(EPS)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入胞外多糖(EPS)，再與HRP標(biāo)記的胞外多糖(EPS)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物底物TMB顯色。TMB在HRP呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450計(jì)算樣品中胞外多糖(EPS)標(biāo)準(zhǔn)品（80mg/L）

標(biāo)本要求

1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于避免反復(fù)凍融

2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，混勻。

2. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

5. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50。

6. 溫育：操作同3。

7. 洗滌：操作同5。

8. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.

9. 終止：每孔加終止。

10. 測(cè)定：以空白孔調(diào)零，nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

操作程序總結(jié)：

計(jì)算

；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)即為樣品的實(shí)際濃度。

注意事項(xiàng)

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．會(huì)有結(jié)晶4． 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請(qǐng)避光保存。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

保存條件及有效期

；2-8℃<span font-size:10.5pt;"="">。

2．有效期：6個(gè)月