會(huì)員.png)
4
當(dāng)前位置：安捷倫科技（中國(guó)）有限公司>>技術(shù)文章>>迎接 2025 版《中國(guó)藥典》丨安捷倫生物制藥解決方案為 ADC 分析提供尖兵利器
迎接 2025 版《中國(guó)藥典》丨安捷倫生物制藥解決方案為 ADC 分析提供尖兵利器
2025 版《中國(guó)藥典》即將頒布和實(shí)施，三部生物制品部分新增至少 10 項(xiàng)生物制品通用技術(shù)要求，新增 10 個(gè)品種各論和修改 80 個(gè)已收載品種各論，安捷倫正在持續(xù)推出基于 2025 版藥典變化的系列應(yīng)用新方案。其中新增《人用抗體偶聯(lián)藥物制品總論》最為引人關(guān)注，本篇主要介紹安捷倫 ADC DAR 值平臺(tái)分析方法及應(yīng)用，包括 QTOF 平臺(tái)（Native SEC-MS 和 RP-MS），HIC-LC 和還原 RP-LC 平臺(tái)，結(jié)合應(yīng)用場(chǎng)景和平臺(tái)優(yōu)勢(shì)，推薦不同的 DAR 值檢測(cè)方法平臺(tái)。
?
人用抗體偶聯(lián)藥物（ADC）系由抗體和有效載荷（payload）通過(guò)連接子（linker）偶聯(lián)而成的治療用藥物。Drug-to-antibody ratio (DAR) 是每個(gè)抗體分子上偶聯(lián)的有效載荷的平均數(shù)量，是 ADC 的最關(guān)鍵質(zhì)量屬性，直接影響其安全性和有效性，因此需要根據(jù)連接子和有效載荷的化學(xué)性質(zhì)、偶聯(lián)方式以及 DAR 異質(zhì)性高低選擇適宜的分析手段。安捷倫開(kāi)發(fā)了針對(duì)半胱氨酸偶聯(lián) ADC 藥物的 DAR 值測(cè)定的平臺(tái)化方案。以維泊妥珠單抗（DAR4）和德曲妥珠單抗（DAR8）為例，我們通過(guò) HIC-HPLC、RP-HPLC 和 Native SEC-Q TOF 和 RP-Q TOF 的四個(gè)不同方法，從完整水平和亞基水平檢測(cè) DAR 值，結(jié)果表明所測(cè) DAR 值有非常高的一致性（圖 1 和圖 2）。
HIC-HPLC 檢測(cè) DAR 值方法以新一代智能化
1260 Infinity III Bio inert LC 或 1290 Infinity III Bio UHPLC 為平臺(tái)，對(duì)超高鹽流動(dòng)相有更好的耐受性。此方法由于使用不揮發(fā)高鹽流動(dòng)相，不能直接進(jìn)入質(zhì)譜表征，而安捷倫 2D LC MS 技術(shù)平臺(tái)可在不改變一維流動(dòng)相基礎(chǔ)上，二維實(shí)現(xiàn)在線除鹽后直接連接質(zhì)譜進(jìn)行表征，MS 定性后可直接計(jì)算 DAR 值。
RP-HPLC 方法是先將 ADC 進(jìn)行還原，反相色譜分離 ADC 不同亞基后，VWD 信號(hào)計(jì)算 DAR 值，此方法可連接 MSD XT 定性還原后的不同輕重鏈片段，因此也可以根據(jù) TIC 信號(hào)計(jì)算 ADC DAR 值。HPLC 方法平臺(tái)以 CDS2 軟件控制結(jié)合定制化 DAR 計(jì)算報(bào)告，自動(dòng)完成 DAR 值計(jì)算，保證計(jì)算準(zhǔn)確性的同時(shí)，提高數(shù)據(jù)處理效率，滿足研發(fā)和 QC 實(shí)驗(yàn)室合規(guī)性要求。
以 Native SEC Q TOF 和還原 RP Q TOF 方法檢測(cè) ADC DAR 的方法中，DAR 計(jì)算由安捷倫 Bioconfirm DAR calculator 軟件自動(dòng)完成，軟件以解卷積后的質(zhì)譜數(shù)據(jù)自動(dòng)識(shí)別不同 DAR 值峰，將峰積分自動(dòng)加權(quán)計(jì)算，即可自動(dòng)完成 DAR 計(jì)算，這樣省卻了大量手動(dòng)計(jì)算工作同時(shí)減少了誤差（圖 3）。應(yīng)用安捷倫 LC Q TOF 平臺(tái)，RP Q TOF 可用于高通量 ADC DAR 值檢測(cè)，結(jié)果穩(wěn)定。
圖 3. Native SEC Q TOF 圖譜及（德曲妥珠單抗）ADC Dar 值計(jì)算（上）；RP Q TOF 圖譜及（德曲妥珠單抗）ADC Dar 值計(jì)算（下），紅線框?yàn)?BioConfirm 軟件 DAR calculator 自動(dòng)計(jì)算 DAR 值設(shè)置界面，軟件以解卷積后的質(zhì)譜數(shù)據(jù)自動(dòng)識(shí)別不同 DAR 值峰，將峰積分自動(dòng)加權(quán)計(jì)算，即可自動(dòng)完成 DAR 計(jì)算
安捷倫開(kāi)發(fā)的基于 
HPLC 和 LC QTOF平臺(tái)檢測(cè) ADC DAR 的四個(gè)方法，可應(yīng)用于 ADC 藥物篩選、工藝開(kāi)發(fā)、質(zhì)量研究和 QC 放行的整個(gè) ADC 藥物研發(fā)周期。
即將發(fā)布的《人用抗體偶聯(lián)藥物制品總論》以及 2024 年發(fā)布的《抗體偶聯(lián)藥物藥學(xué)研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》為 ADC 藥物的研究和分析提供了重要指導(dǎo)作用。持續(xù)關(guān)注安捷倫，我們將不斷推出 ADC 藥學(xué)研究和生物分析方面的解決方案，和您一起探索 ADC 分析中的問(wèn)題和挑戰(zhàn)。
如希望了解更多安捷倫 ADC 分析表征解決方案，請(qǐng)掃碼下方二維碼獲取：
1. 生物制藥工作流程解決方案加速 ADC DAR 表征
2. 使用 UHPLC/Q-TOF 聯(lián)用系統(tǒng)測(cè)定抗體藥物 偶聯(lián)物 (ADC) 的藥物/抗體比率 (DAR)。
3. 分析抗體-藥物偶聯(lián)物的藥物結(jié)合位點(diǎn)利用自動(dòng)化樣品前處理與 LC/MS 分析
4. 利用正交分析方法提高抗體藥物偶聯(lián) 物的質(zhì)量
5. 測(cè)定血清純化所得的抗體藥物偶聯(lián)物的藥物/抗體比率
