在上期內(nèi)容中，我們重點為大家介紹并推薦了適用于中草藥檢測的各類安捷倫色譜柱，以便大家在日后的檢測工作中匹配使用。本期繼續(xù)帶來適用于車前子配方顆粒檢測的色譜柱推薦，跟上我們，精彩繼續(xù)！

本實驗選用的色譜柱 InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 采用 Agilent 專有的表面多孔型填料技術(shù), 其 2.7 μm 色譜柱的分離速度和分離度能媲美亞二微米全多孔類型的色譜柱，但柱壓僅有其一半。同時柱頭采用較大的 2 μm 篩板能耐受更“臟"的樣品，有利于提高色譜柱的耐受性。特征譜圖采用的 Poroshell 120 EC-C18(2.1x100mm, 2.7μm) 色譜柱，測試結(jié)果*符合標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。

根據(jù)國家藥品監(jiān)督管理局 《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)》中車前子配方顆粒的檢測項目，對其特征譜圖和含量測定都采用超高效液相色譜法。特征譜圖測定中要求理論板數(shù)按京尼平苷酸峰計算應(yīng)不低 3000，供試品呈現(xiàn)的特征峰保留時間應(yīng)與對照品相對應(yīng)。含量測定中規(guī)定了理論板數(shù)按京尼平苷酸峰計算應(yīng)不低于 3000。本文采用 Infinity 1290 超高效液相色譜儀以及 InfinityLab Poroshell 120 EC-C18, 2.1x100mm, 2.7μm 色譜柱對車前子配方顆粒的特征譜圖進(jìn)行了分析，并對車前子配方顆粒中京尼平苷酸和毛蕊花糖苷的含量進(jìn)行了測定。此外，我們也對該方法進(jìn)行了加速，能夠?qū)崿F(xiàn)更快速的分析。

1、 特征譜圖

色譜條件：  

標(biāo)準(zhǔn)方法：  

流動相：A：CH3OH；B：0.3%醋酸水  

梯度：0-0.2min，95%B；0.2-8min，95%B-40%B；8-10min，40-95%B；10-15min，95%B  

流速：0.3ml/min  

柱溫：30°C  

檢測波長：245nm(4nm),Ref:off;采樣頻率：20Hz  

進(jìn)樣量：2μL  

加速方法：  

梯度：0-0.1min，95%B；0.1-4min，95%B-40%B；4-5min，40-95%B；5-7.5min，95%B  

流速：0.6ml/min  

其余同上。

結(jié)果

1）使用Poroshell色譜柱，能準(zhǔn)確定位供試品中的4個特征峰；供試品色譜圖中，未出現(xiàn)與車前子苷對照品參照物峰保留時間一致的色譜峰。

2）標(biāo)準(zhǔn)方法和加速方法的理論板數(shù)按京尼平苷酸峰計算分別為 38475 和 37988，大于規(guī)定值 3000，結(jié)果符合要求。

3） 使用加速方法加速分析后，分析時間縮短 7.5 分鐘(50% 時間節(jié)省)。

2、 含量測定

色譜條件：

標(biāo)準(zhǔn)方法：  

流動相：A：CH3OH；B：0.5%醋酸水  

梯度：0-0.2min，95%B；0.2-10min，95%B-40%B；10-10.1min，40-95%B；10.1-15min，95%B  

流速：0.3ml/min  

柱溫：30°C  

檢測波長：245nm(4nm),Ref:off;采樣頻率：20Hz  

進(jìn)樣量：2μL  

加速方法：  

梯度：0-0.1min，95%B；0.1-5min，95%B-40%B；5-5.05min，40-95%B；5.05-7.5min，95%B  

流速：0.6ml/min  

其余同上。

結(jié)果

1）使用該方法測定京尼平苷酸和毛蕊花糖苷的含量，京尼平苷酸的理論板數(shù)符合標(biāo)準(zhǔn)中的規(guī)定。

2）通過提高一倍流速，可加速分析方法，分析時間縮短至 7.5 min(50%時間節(jié)省)。

實驗結(jié)論

本實驗選用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 色譜柱對車前子配方顆粒特征譜圖及含量進(jìn)行了檢測，均符合標(biāo)準(zhǔn)中對系統(tǒng)適用性的要求。本方法可用于車前子配方顆粒的分離和檢測，為該配方顆粒的質(zhì)量保證提供檢測依據(jù)。

儀器系統(tǒng)及色譜柱推薦