快速了解如何精準測試核酸熱解鏈溫度
核酸研究
在核酸研究領(lǐng)域,天然的功能核酸(如各種miRNA、IncRNA以及shRNA等)和人工篩選的功能核酸(如脫氧核酶、核酶及適配體等)不斷被發(fā)現(xiàn)或篩選出來。在基因功能研究、藥物發(fā)現(xiàn)、生物傳感器探針等領(lǐng)域的應(yīng)用研究越來越多,尤其是核酸藥物(如反義核酸、小干擾RNA等)的陸續(xù)上市,使得核酸成為當前生命科學(xué)和藥物研究的熱點之一。而核酸的高級結(jié)構(gòu)是其行使這些功能的物質(zhì)基礎(chǔ),因此高級結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性是核酸應(yīng)用中需要考慮的至關(guān)重要的因素。對于核酸這類的較大的分子藥物,紫外光譜是研究其結(jié)構(gòu)變化的可行且簡單的方法。
核酸結(jié)構(gòu)的特性
1 核酸結(jié)構(gòu)隨溫度的變化是可逆的,且不會使核酸變性。在一定的溶液條件下,一個核酸序列依賴氫鍵和靜電作用在低溫形成特定的高級結(jié)構(gòu),芳香性堿基發(fā)生堆積,產(chǎn)生減色效應(yīng),導(dǎo)致紫外吸收值降低。
2 當溫度升高時,氫鍵和堿基堆積等弱相互作用被逐漸破壞,紫外吸收值逐漸升高。因此,配備溫度控制的紫外光譜儀非常適合研究核酸結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。
3 隨溫度的升高或者降低,當核酸的紫外吸收值達到高值的一半時,所對應(yīng)的溫度被定義為核酸的熔點,用Tm表示。Tm的大小反應(yīng)核酸結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性的高低。當Tm值越大,核酸的高級結(jié)構(gòu)越穩(wěn)定。
基于以上特性,控溫型紫外光譜儀在核酸結(jié)構(gòu)研究中能發(fā)揮獨一無二的作用。
Cary3500UV-Vis分光光度計可搭配多種不同配置的控溫附件,并為核酸研究用戶帶來精準的測試結(jié)果。儀器采用了獨家的空冷控溫技術(shù),升溫速率可以從0.1℃/min到40℃/min,不僅能夠分辨核酸高級結(jié)構(gòu)變化中的多種形態(tài),同時,一體化的附件設(shè)計理念也可避免傳統(tǒng)水控溫裝置繁雜的管線和工作噪聲。
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