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沙門診斷血清采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，針對(duì)沙門氏菌血清型特異性基因設(shè)計(jì)引物和探針。PCR擴(kuò)增過程中，與模板結(jié)合的探針被Taq酶分解產(chǎn)生熒光信號(hào)，熒光定量PCR儀根據(jù)檢測(cè)到的熒光信號(hào)繪制出實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線，從而實(shí)現(xiàn)沙門氏菌血清型在核酸水平上的鑒定。

檢測(cè)步驟：

1、核酸提取

加熱法：刮取至少10個(gè)菌落，懸浮于100μL的無菌水中，漩渦震蕩10s（如果菌落未能均勻分散，可適當(dāng)延長(zhǎng)震蕩時(shí)間），95℃或沸水浴5min，冷卻至室溫，12000rpm離心5min，吸取上清。

試劑盒法：可使用商品化的試劑盒提取沙門氏菌的基因組DNA。

2、反應(yīng)體系配置

從試劑盒中取出預(yù)混液，充分融化，渦旋后短暫離心，取22.5μL置于PCR管或PCR板中，然后各取模板2.5μL分別加入PCR管或PCR板中（每種模板要使用十二種預(yù)混液），蓋好管蓋或板膜，短暫離心，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。

3、PCR擴(kuò)增

PCR管或PCR板置于PCR儀上，推薦反應(yīng)程序設(shè)定如下：反應(yīng)體系為25μL，在第二步每個(gè)循環(huán)60℃時(shí)檢測(cè)熒光信號(hào)，檢測(cè)通道選擇FAM、HEX（VIC）、CY5。

丹麥SSI沙門診斷血清試劑盒

貨號(hào)	丹麥SSI沙門診斷血清試劑盒產(chǎn)品名稱	包括分組	包裝規(guī)格	測(cè)試次數(shù)
40220	沙門氏菌O抗原診斷血清O:2	A	3 mL vial	150
23839	沙門氏菌O抗原診斷血清O:4	B	3 mL vial	150
40221	沙門氏菌O抗原診斷血清O:6, 7, 8	C1, C2, C3, H	3 mL vial	150
65335	沙門氏菌O抗原診斷血清O:7, 8	C1, C2, C3	3 mL vial	150
40224	沙門氏菌O抗原診斷血清O:8	C2, C3	3 mL vial	150
40276	沙門氏菌O抗原診斷血清O:9	D1, D2, D3	3 mL vial	150
40226	沙門氏菌O抗原診斷血清O:3, 10, 15	E1, E4	3 mL vial	150
23843	沙門氏菌O抗原診斷血清O:1, 3, 19	E1, E4	3 mL vial	150
40227	沙門氏菌O抗原診斷血清O:11	F	3 mL vial	150
40228	沙門氏菌O抗原診斷血清O:13, 22, 23	G1, G2	3 mL vial	150
40229	沙門氏菌O抗原診斷血清O:6, 14, 24, 25	H	3 mL vial	150
40230	沙門氏菌O抗原診斷血清O:16	I	3 mL vial	150
40231	沙門氏菌O抗原診斷血清O:17	J	3 mL vial	150
40232	沙門氏菌O抗原診斷血清O:18	K	3 mL vial	150
40233	沙門氏菌O抗原診斷血清O:21	L	3 mL vial	150
40234	沙門氏菌O抗原診斷血清O:28	M	3 mL vial	150
40235	沙門氏菌O抗原診斷血清O:30	N	3 mL vial	150
40236	沙門氏菌O抗原診斷血清O:35	O	3 mL vial	150
40237	沙門氏菌O抗原診斷血清O:38	P	3 mL vial	150
40238	沙門氏菌O抗原診斷血清O:39	Q	3 mL vial	150
40239	沙門氏菌O抗原診斷血清O:40	R	3 mL vial	150
40240	沙門氏菌O抗原診斷血清O:41	S	3 mL vial	150
40241	沙門氏菌O抗原診斷血清O:42	T	3 mL vial	150
40242	沙門氏菌O抗原診斷血清O:43	U	3 mL vial	150
40243	沙門氏菌O抗原診斷血清O:44	V	3 mL vial	150
40244	沙門氏菌O抗原診斷血清O:45	W	3 mL vial	150
40245	沙門氏菌O抗原診斷血清O:47	X	3 mL vial	150
40247	沙門氏菌O抗原診斷血清O:48	Y	3 mL vial	150
40248	沙門氏菌O抗原診斷血清O:50	Z	3 mL vial	150
40249	沙門氏菌O抗原診斷血清O:51	51	3 mL vial	150
40250	沙門氏菌O抗原診斷血清O:52	52	3 mL vial	150
40251	沙門氏菌O抗原診斷血清O:53	53	3 mL vial	150
40252	沙門氏菌O抗原診斷血清O:54	54	3 mL vial	150
40253	沙門氏菌O抗原診斷血清O:55	55	3 mL vial	150
40254	沙門氏菌O抗原診斷血清O:56	56	3 mL vial	150
40255	沙門氏菌O抗原診斷血清O:57	57	3 mL vial	150
40257	沙門氏菌O抗原診斷血清O:58	58	3 mL vial	150
40258	沙門氏菌O抗原診斷血清O:59	59	3 mL vial	150
40259	沙門氏菌O抗原診斷血清O:60	60	3 mL vial	150
40260	沙門氏菌O抗原診斷血清O:61	61	3 mL vial	150
40261	沙門氏菌O抗原診斷血清O:62	62	3 mL vial	150
40263	沙門氏菌O抗原診斷血清O:63	63	3 mL vial	150
40264	沙門氏菌O抗原診斷血清O:65	65	3 mL vial	150
40265	沙門氏菌O抗原診斷血清O:66	66	3 mL vial	150
40266	沙門氏菌O抗原診斷血清O:67	67	3 mL vial	150
40267	沙門氏菌O抗原診斷血清T1		3 mL vial	150
40268	沙門氏菌O抗原診斷血清T2		3 mL vial	150

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