酶聯免疫吸附測定試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被大鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

　　【標本收集注意事項】

　　收集血液的試管應為一次性的無熱原，無內毒素試管。

　　血清和血漿避免使用溶血，高血脂標本。

　　標本應清澈透明，懸浮物應離心去除。

　　標本收集后若不及時檢測，需按一次使用量分裝，凍存于-20℃，-80℃電冰箱內，避免反復凍融。

　　可根據標本的實際情況，做適當倍數稀釋(建議做預實驗，以確定稀釋倍數)。

　　收集標本，盡量做到雙份的用量，避免一次實驗失敗，重復實驗時標本缺失，從而耽誤實驗進程。

　　收集標本時，應該做好防護措施（比如戴手套，口罩，護目鏡等），認為所有標本都具有一定的潛在危險性。

　　樣本處理應該在生物安全柜里面，并且正確使用生物安全柜。

　　【注意事項】

　　酶聯免疫吸附測定試劑盒使用前請保存在2-8℃。除復溶后的標準品，其他成分不可凍結。

　　濃縮酶結合物體積小，運輸中顛簸和可能的倒置，會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請用手甩幾下或1000rpm離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。

　　濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，使結晶*溶解后再配制洗滌液。