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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
JM330 菌株(即 DH5α T1 Phage Resistant)，來源于 DH5α 菌株；通過在 DH5α 大腸桿菌基因組中引入
了 tonA 突變獲得，因而具有抵抗噬菌體 T1 和 T5 的能力。JM330 菌株最大的特點(diǎn)是其可以在體內(nèi)
特異性降解甲基化的質(zhì)粒模板，被廣泛應(yīng)用于 DNA 定點(diǎn)突變實(shí)驗(yàn)（即反應(yīng)產(chǎn)物在轉(zhuǎn)化之前無需再
進(jìn)行 DpnI 酶切處理）。JM330 菌株缺失核酸內(nèi)切酶 (endA1)和重組酶(recA1)，提高了質(zhì)粒 DNA 的
產(chǎn)量和質(zhì)量； lacZΔM15 的存在使 JM330 可用于藍(lán)、白斑篩選實(shí)驗(yàn)。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測(cè)，
JM330 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA 以上。
產(chǎn)品組成
組分
JM330 感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100μL
100 × 100μL
定制
基因型：F- φ80 lacZ?M15 ?(lacZYA-argF) U169 recA1 endA1 hsdR17 (rK- mK+) phoA supE44 λ- thi-1 gyrA96 relA1 tonA
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存，請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90 s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入900 μL LB或SOC培養(yǎng)基（室溫或37 ℃預(yù)熱），然后置于37 ℃搖床復(fù)壯45 min；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔
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