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詳細介紹
產品簡介
Stbl3 菌株來源于大腸桿菌 HB101 菌株，是慢病毒載體系統(tǒng)推薦使用的菌株。基因組帶有重組酶
recA13 突變，可有效抑制長片段末端重復區(qū)的重組，降低錯誤重組的概率；但由于菌株不含核酸
酶 endA1 突變，因此體內核酸酶含量較高，在提取質粒時務必使用質粒提取試劑盒中的去蛋白液進
行處理，否則抽提出的質粒很不穩(wěn)定，易降解。此菌株具有鏈m素抗性，不存在 lacIqZΔM15，不
可用于藍/白斑篩選實驗。經 pUC18 轉化檢測，Stbl3 感受態(tài)細胞的效率可達 108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
Stbl3 化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- mcrB mrr hsdS20(rB- mB- ) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20 (StrR) xyl-5 λ- leu mtl-1 endA1+
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
產品特性
-屬于大腸桿菌 K 株系列，主要用于目標基因的克隆和質粒的保存；不可用于以 T7 RNA 聚合酶為
表達系統(tǒng)的蛋白表達；
-該菌株適合克隆不穩(wěn)定插入片段，甲基化的基因組序列，以及慢病毒載體的構建。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90 s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入900 μL LB或SOC培養(yǎng)基（室溫或37 ℃預熱），然后置于37 ℃搖床復壯45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優(yōu)良轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔
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