詳細介紹
產品簡介
Shuffle T7 Express lysY 來源于大腸桿菌 B 菌株,在染色體上組成型表達二硫鍵異構酶 DsbC,該酶
可幫助二硫鍵錯誤折疊的蛋白形成正確的構型,從而促進胞質中的含二硫鍵蛋白的高效表達;同
時,該菌株也適合表達毒性蛋白。此外,Shuffle T7 Express 有 Cam、Nit、Spec 和低濃度 Str 的抗
性,也可抵抗噬菌體 T1(fhuA2)噬菌體的侵染。經 pUC18 轉化檢測,Shuffle T7 Express lysY 感受態(tài)
細胞的效率可達 108 cfu/μg DNA 以上。
產品組成
組分 CC96161-01 CC96161-02 CC96161-03
Shuffle T7 Express lysY
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:MiniF lysY (CamR)/fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT ahpC gal λatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR, lacIq) ΔtrxB sulA11
R(mcr-73::miniTn10--TetS )2 [dcm] R(zgb-210::Tn10 --TetS) endA1 Δgor ?(mcrC-mrr)114::IS10
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;
5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優(yōu)良轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。