DB3.1 化轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)本公司生產(chǎn)的大腸桿菌 DB3.1 細(xì)胞含有 gyrA462 基因，對(duì) λ 噬菌體的 ccdB 基因產(chǎn)物的毒性具有抵抗作用，特別適用于轉(zhuǎn)化和擴(kuò)增包含 ccdB 基因的質(zhì)粒載體。使用 pUC18 質(zhì)粒檢測(cè)，轉(zhuǎn)化效率可達(dá)107 cfu/μg DNA.，－80 ℃ 保存幾個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。每支感受態(tài)可以酌情分裝使用，降低了實(shí)驗(yàn)的成本。質(zhì)量穩(wěn)定，使用方便，質(zhì)優(yōu)價(jià)廉。

DB3.1 化轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

本公司生產(chǎn)的大腸桿菌 DB3.1 細(xì)胞含有 gyrA462 基因，對(duì) λ 噬菌體的 ccdB 基因產(chǎn)物的毒性具有抵

抗作用，特別適用于轉(zhuǎn)化和擴(kuò)增包含 ccdB 基因的質(zhì)粒載體。使用 pUC18 質(zhì)粒檢測(cè)，轉(zhuǎn)化效率可達(dá)

107 cfu/μg DNA.，－80 ℃ 保存幾個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。每支感受態(tài)可以酌情分裝使用，降低

了實(shí)驗(yàn)的成本。質(zhì)量穩(wěn)定，使用方便，質(zhì)優(yōu)價(jià)廉。

產(chǎn)品組成

組分 CC96182-01 CC96182-02 CC96182-03

DB3.1 感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- gyrA462 endA1 Δ(sr1-recA) mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-) supE44ara-14 galK2 lacY1 proA2

rpsL20(SmR) xyl-5 λ- leu mtl1

DB3.1 化轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)

存儲(chǔ)條件

-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

產(chǎn)品特性

- DB3.1 感受態(tài)細(xì)胞具有鏈霉素抗性

質(zhì)量控制

無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。

DB3.1 化轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保。高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。