一、RNA的提取

二、DNase|消化樣品RNA 中的DNA

三、RNA瓊脂糖凝膠電泳

四、RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA

Real-Time PCR引物設(shè)計的要求

1Tm=55~65℃

2 GC=30~80%

3 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物長度:引物的產(chǎn)物大小不要太大，一般在80~300 bp之間都可。

4 引物的退火溫度要高，一般要在60 ℃以上。

五、cDNA與引物質(zhì)量檢測

選擇特異性好，擴(kuò)增效率高的引物作為實(shí)時熒光使用引物。

六、利用相對定量的方法分析目的基因表達(dá)量的情況:

常用的看家基因有B-actin，GAPDH，18S rRNA

七、定量PCR檢測

八、擴(kuò)增曲線和溶解曲線

溶解曲線全部為單峰表明為特異性擴(kuò)增，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段;熒光背暑信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。

我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、精良的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊包括研究員（博士后）2人，助理研究員（博士）4人，核心研究員（碩士）15人，主要致力于基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、生物化學(xué)、病理檢測、基因檢測等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣。通過高度細(xì)分、較好的的服務(wù)平臺，為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。目前，及，涉及臨床醫(yī)學(xué)、腫瘤生物學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域。