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黃曲霉素是一類真菌(主要是黃曲霉和寄生曲霉)代謝的有產(chǎn)物,主要存在于谷物,堅果,棉籽以及一些與人類血液,動物飼料相關(guān)的產(chǎn)品中。黃曲霉素以AFB1、AFB2、AFG1和AFG2這四種素為主,黃曲霉素總量一般是指這四種素的總量。它們是I類致癌物,被證明對人和動物的肝臟、腎臟等組織和器官具有很大的危害,是一類性很強的致癌物質(zhì)。因此,必須對其進行及時檢測監(jiān)控,目前主要的檢測手段是高效液相色譜法。(HPLC)
黃曲霉素總量ELISA檢測試劑盒是基于免疫競爭法檢測原理建立的一種快速定量檢測黃曲霉總量的試劑盒。它具有簡單、快速,無需特殊儀器設(shè)備等優(yōu)勢,既可以用于實驗室檢測,也可在農(nóng)場、飼料混合車間等進行實地測定。
【注意事項】
1. 室溫低于20℃或試劑及樣本沒有恢復到室溫(20~25℃)會導致所有標準的OD值偏低。
2. 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標準曲線不成線性,重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3. 每種試劑使用前均需搖勻。
4. 反應終止液為0.5M硫酸,避免接觸皮膚。
5. 不要使用過了有效期的試劑盒;也不要摻雜使用過了有效期的試劑盒;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6. 儲存條件:
試劑盒保存于2~8℃,不能冷凍,將不用的微孔板重新真空密封。標準物質(zhì)和無色的顯色劑對光敏感,因此要避光保存。
7. 試劑變質(zhì)的跡象:
顯色試劑有任何顏色表明顯色劑變質(zhì),應當棄之。0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質(zhì)。
8. 加入顯色液后,一般顯色時間為15~30min。若顏色較淺,可延長反應時間到35min(或更長),但不得超過40min。反之,則減短反應時間。
9. 黃曲霉素總量ELISA檢測試劑盒反應溫度為25℃,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
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