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小分子PEG
DM4PEG m-PEG16-alcoho Pyrene-PEG3-azide N3-PEG9-COOH HO-PEG16-OH N3-PEG4-COOH N3-PEG5-NH2 Ms-PEG3-Ms PEG13 m-PEG10-alcohol mPEG7-COOH m-PEG3-alcohol Tr-PEG9 THP-PEG4 Acid-PEG6-SS-PEG6-acid H2N-PEG8-COOH 2-(t-Butoxycarbonylamido)-1 Dibenzocyclooctyne-acid HO-PEG10-tBu DM1 THP-PEG9 m-PEG8-alcohol m-PEG8-Ms 2-(Biotin-amido) N3-PEG6-CH2CH2COOtBu Mal Tr-PEG3 Fmoc m-PEG9-CH2COOH THP-PEG6 m-PEG7-CH2COOH Propargyl-PEG7-alcohol N3-PEG5-SPA, N3-PEG1-CH2CO2H PEG21 N-Boc-Tris Acid-PEG3-SS-PEG3-acid N3-PEG2-COOH DBCO-S-S-PEG3-biotin m-PEG3-Ms m-PEG6-CH2COOH THP-PEG7 Sulfo-NHS-Acetate Mal-C4-NH-Boc Azido-SS-PEG2-acid N3-PEG10-NHS Tr-PEG6 1,3-bis(carboxyethoxy)-2,2-bis( N3-PEG9-NH2 PEG16 Tr-PEG7 N3-PEG12-COOH m-PEG13-Ms Tos-PEG6-Tos MC-MMAF SPDP m-PEG9-alcohol PEG15 Tetrazine-Acid N3-PEG10-COOH SPDP-C6-NHS ester t-Boc-Cystamine N3-PEG5-OH PEG8-Tos N3-PEG8-OH Ms-PEG8-Ms MC-Val-Cit-PAB-OH N3-PEG36-COOH Acid-PEG2-SS-PEG2-acid Ald-PEG4-azide Sulfo-NHS Auristatin E, THP-PEG12 N3-PEG6-NH2 N3-PEG8-NH2 m-PEG5-CH2COOH m-PEG4-alcohol m-PEG6-Ms PEG12 m-PEG2-COOH PROPARYL-PEG3-ME m-PEG4-CH2COOH N3-PEG8-NHS N3-PEG7-OH N3-PEG4-CH2CH2COOtBu THP-PEG3 PEG5-Ms Azide-SS-biotin Fmoc-PEG4-Ala-Ala-Asn-PAB m-PEG11-alcohol N3-PEG5-CH2CH2COOtBu N3-PEG1-NH2 2-t-Butoxycarbonylamino-1 Tr-PEG4 Fmoc-Val-Cit-PAB-OH, Thiol PEG Tetrazine-PEG TCO-PEG Sugar PEG Propargyl PEG Poly PEG PEG-X-PEG PEG Tosylate PEG Sulfonic acid PEG Phosphonate PEG PFP ester PEG Peptide PEG NHS ester PEG Maleimide PEG azide PEG Aldehyde PEG Acid Non-PEG linker MeNH-PEG m-PEG Hydroxy(OH) PEG Fluorescent PEG DSPE PEG DNP-PEG DBCO PEG Cleavable PEG Bromo PEG Boc-PEG Biotin PEG Benzyl-PEG Aminooxy PEG Amino PEG Alkyne PEG
磷脂
熒光染料
螯合劑
點擊試劑
高分子PEG
交聯(lián)劑
抑制劑
有機硅
雜環(huán)砌塊
金屬催化劑
多肽
分析試劑
Biotin

FITC葡聚糖 熒光素異硫氰酸酯葡聚糖(FITC-Dextran)

時間:2019/7/2閱讀:1789
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FITC葡聚糖-熒光素異硫氰酸酯葡聚糖

化學(xué)名:

葡聚糖(3´,6´-二羥基-3-氧代螺(異苯并呋喃--1(3H),9´-[9H]占噸]-5(或6)-基)氨基硫代甲酸酯
熒光素異硫氰酸酯-葡聚糖
熒光素基硫代氨基甲?;?葡聚糖

CAS號:60842-46-8

結(jié)構(gòu)

結(jié)構(gòu)

定義
MW:重均分子量
Mn:數(shù)均分子量
DS:定義為多糖鏈中每個糖分子上取代分子的數(shù)目

 

特性

用熒光素對基于天然葡聚糖B512F所制備的特選葡聚糖組分進(jìn)行標(biāo)記,標(biāo)記時采用穩(wěn)定的硫代氨基甲酰鍵連接基團(tuán),標(biāo)記步驟不會導(dǎo)致葡聚糖發(fā)生任何降解1,F(xiàn)ITC-葡聚糖的DS范圍為0.002-0.008,在該取代低水平范圍內(nèi),反應(yīng)對葡聚糖本身所帶來的變化被盡可能地減少了。這一點對滲透性研究而言非常重要。

FITC-葡聚糖以黃色/橙色粉末形式供應(yīng),其在水中可以自由溶解,也可以黃色溶液形態(tài)的鹽溶液形式供應(yīng)。該產(chǎn)品也可溶于DMSO、甲酰胺等某些極性有機溶劑,但不溶于低級脂肪醇、丙酮、Chloroform,CHCl3、二甲基甲酰胺??梢酝ㄟ^在劇烈攪拌下將粉末緩慢加入到溫水(約60℃)中來實現(xiàn)高分子量組分的溶解。

分子量大于5 000道爾頓的葡聚糖分子在溶液中表現(xiàn)為柔性線團(tuán)型(coil)鏈段。表1(下表)顯示了不同分子量分子的尺寸。葡聚糖和FITC-葡聚糖呈現(xiàn)牛頓流動特性,即粘度與剪切速率無關(guān)。

 

葡聚糖Mw

Stokes半徑Å

回轉(zhuǎn)半徑Å

2 x 106

270

380

1 x 106

199

275

500 000

147

200

200 000

130

130

100 000

69

95

70 000

58

80

40 000

44.5

62

10 000

23.6

-

表1.葡聚糖的分子尺寸。

 

光譜數(shù)據(jù)

光譜數(shù)據(jù)

圖1. 在0.025M硼酸鹽pH9.0(10mg 鹽溶于50ml緩沖液中)中,F(xiàn)ITC-葡聚糖70的熒光掃描光譜。激發(fā)波長:495nm;發(fā)射波長:520 nm。

FITC-葡聚糖在pH 4-9范圍內(nèi)的熒光光譜(發(fā)射波長:520nm)

圖2.FITC-葡聚糖在pH 4-9范圍內(nèi)的熒光光譜(發(fā)射波長:520nm)


儲存和穩(wěn)定性

FITC-葡聚糖在體外和體內(nèi)的穩(wěn)定性都非常好——只有在高pH(> 9)和高溫下,熒光素標(biāo)記才有發(fā)生水解的風(fēng)險。在37°C的兔血漿、肌勻漿、肝勻漿和尿液研究中,F(xiàn)ITC-葡聚糖的穩(wěn)定期均不短于3天,Mw無任何變化,熒光素組分釋放不可見。 在6%的TCA中,F(xiàn)ITC-葡聚糖可以在室溫下穩(wěn)定3天2。高壓滅菌的FITC-葡聚糖70溶液可以在8至50℃下儲存長達(dá)5個月,只有50℃樣品中的游離氨基-熒光素含量出現(xiàn)略微增加(1%)。FITC-葡聚糖在pH4下保持穩(wěn)定,但在pH9下,其熒光強度會在35℃、1個月內(nèi)出現(xiàn)相當(dāng)大的下降(24%)。數(shù)項研究3均證實了在實驗(1-6天)期間FITC-葡聚糖的體內(nèi)穩(wěn)定性。

 

FITC-葡聚糖的應(yīng)用

FITC-葡聚糖主要用于細(xì)胞和組織中的滲透性和運輸研究,但也可用于其他材料(過濾器、凝膠等)的滲透性研究。其有一點*優(yōu)勢在于通過測量熒光,可以提供健康或患病組織的實時滲透性定量數(shù)據(jù)。活體熒光顯微鏡具有高靈敏度,即使組織液中的熒光濃度低至1μg/ ml也可以檢測得到。人們已經(jīng)開發(fā)了數(shù)個模型來方便實時研究4,5,F(xiàn)ITC-葡聚糖也可用作細(xì)胞中的pH探針6,7。人們在偏振實驗中還發(fā)現(xiàn),激發(fā)態(tài)的壽命與共軛之前的壽命差不多。

FITC-葡聚糖在以下研究領(lǐng)域都已表現(xiàn)出了自身價值(我們從各個主題的眾多文章中挑選出來的參考文獻(xiàn)):

  1. 腸道組織滲透性研究8-10
  2. 腦和神經(jīng)系統(tǒng)滲透性研究11-13
  3. 腫瘤組織滲透性研究14-16
  4. 眼內(nèi)滲透性研究17-19
  5. 腎組織滲透性研究20

注入FITC-葡聚糖150后的頰囊圖像。

圖3. 注入FITC-葡聚糖150后的頰囊圖像。第二張圖像顯示了注入組胺后微血管出現(xiàn)的滲漏。 (已獲得E.Svensjö許可)。

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