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青島聚創(chuàng)美家環(huán)保技術(shù)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第8年

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微生物李斯特菌檢測(cè)板

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌聚創(chuàng)環(huán)保

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地青島市

更新時(shí)間:2019-01-10 10:21:23瀏覽次數(shù):1246次

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產(chǎn)地類別 國(guó)產(chǎn) 價(jià)格區(qū)間 面議
微生物李斯特菌檢測(cè)板檢測(cè)的李斯特菌包括單核細(xì)胞增生李斯特菌(Listeria.monocytogenes ),英諾克李斯特菌(Listeria.innocua),威氏李斯特菌(Listeria.welshi),但不能區(qū)分各種菌。

一、微生物李斯特菌檢測(cè)板產(chǎn)品介紹
1、微生物李斯特菌檢測(cè)板原理及適用范圍
李斯特菌檢測(cè)板是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,含有標(biāo)準(zhǔn)的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,選擇性試劑,冷水可溶性吸水凝膠和β-D-葡萄糖苷酶(β-D-glucosidase)的顯色底物( X-GLU ),適用于檢測(cè)或者計(jì)數(shù)食品及環(huán)境樣品中的李斯特菌菌數(shù)。李斯特菌檢測(cè)板檢測(cè)的李斯特菌包括單核細(xì)胞增生李斯特菌(Listeria.monocytogenes ),英諾克李斯特菌(Listeria.innocua),威氏李斯特菌(Listeria.welshi),但不能區(qū)分各種菌。 
2、操作方法
2.1 食品樣品檢測(cè)
2.1.1 食品樣品處理:取樣品25 g(mL)放入裝有225 mL滅菌磷酸鹽緩沖液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)袋內(nèi),制成1:10的樣品勻液。根據(jù)樣品污染程度及檢驗(yàn)需要,可進(jìn)一步制成10倍遞增的樣品稀釋液,選擇2~3 個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)來(lái)進(jìn)行接種。 
2.2 環(huán)境樣品檢測(cè)
2.2.1 環(huán)境樣品采集:用無(wú)菌的涂抹棒或其他采樣設(shè)備收集環(huán)境樣品。濕潤(rùn)采樣設(shè)備液體體積≤10 mL。濕潤(rùn)劑可以為無(wú)菌水,滅菌生理鹽水(磷酸鹽緩沖液)或者緩沖蛋白胨水。
2.2.2 環(huán)境樣品處理:在收集的環(huán)境樣品中添加10 mL 滅菌生理鹽水(或磷酸鹽緩沖液),充分混勻。根據(jù)樣品污染程度及檢驗(yàn)需要,可進(jìn)一步制成10倍遞增的樣品稀釋液,選擇2~3 個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)來(lái)進(jìn)行接種。 
2.3 接種:將李斯特菌檢測(cè)板上層膜不干膠標(biāo)簽部分揭開(kāi),用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液均勻滴加到紙片上,迅速貼好上層膜并水平晃動(dòng)檢測(cè)板,靜置10 s左右,待樣品勻液被吸附在濾紙上。每個(gè)稀釋度接種兩個(gè)檢測(cè)板作為重復(fù)。
2.4 培養(yǎng):將檢測(cè)板疊在一起,倒置于36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),培養(yǎng)18~24h。
3、結(jié)果判讀
在檢測(cè)板上生長(zhǎng)的藍(lán)綠色點(diǎn)即為李斯特菌陽(yáng)性點(diǎn),若檢測(cè)板上無(wú)菌生長(zhǎng)或者長(zhǎng)出點(diǎn)為其他顏色點(diǎn)即為李斯特菌陰性。

                 

4、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式
4.1 樣品計(jì)數(shù)
4.1.1 以生長(zhǎng)有30~300CFU的檢測(cè)板為計(jì)數(shù)適宜范圍。
4.1.2 若只有一個(gè)稀釋度檢測(cè)板上的菌落數(shù)在計(jì)數(shù)合適范圍30~300CFU之間,則計(jì)算兩個(gè)檢測(cè)板菌落數(shù)的平均值,再除以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),作為每克(毫升)中菌落總數(shù)結(jié)果。
4.1.3 若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí),按式(1)計(jì)算:
                       ∑C
               N= ————————       •••••••••••••••••••(1) 
                   (n1+0.1n2)d
式中:
N——樣品中李斯特菌菌落數(shù);
∑C——兩個(gè)連續(xù)稀釋度檢測(cè)板(含適宜范圍菌落數(shù)的檢測(cè)板)李斯特菌落數(shù)之和;
n1——適宜范圍菌落數(shù)的*個(gè)稀釋度(低)檢測(cè)板個(gè)數(shù);
n2——適宜范圍菌落數(shù)的第二個(gè)稀釋度(高)檢測(cè)板個(gè)數(shù);
d——*稀釋度的稀釋倍數(shù)
 示例:

稀釋度

1:10(*個(gè)稀釋度)

1:100(第二個(gè)稀釋度)

菌落數(shù)

245,247

31,30


               (245+247+31+30)
               N= ————————  =2514
                  (2+0.1×2)×10-1
結(jié)果表述為2.5×103CFU/g(mL)。
4.1.4 若所有稀釋度檢測(cè)板上均無(wú)菌落生長(zhǎng),則以小于1/d(d—*低稀釋倍數(shù))計(jì)算。
4.1.5 低數(shù)值的估算:如果實(shí)驗(yàn)樣品原液(水及液體飲料)或初始稀釋?xiě)乙海ㄆ渌麡悠罚┑膬蓚€(gè)檢測(cè)板上的菌落數(shù)均小于30CFU,計(jì)算兩個(gè)檢測(cè)板上的菌落數(shù)的平均數(shù)。計(jì)算式(2):
                            ∑C
                  NE = ——    •••••••••••••••••••(2)
                            nd
式中:
NE——每毫升或每克樣品中菌數(shù)的估算值;
∑C——兩個(gè)檢測(cè)板上菌落數(shù)的和;
n——檢測(cè)板的數(shù)量;
d——樣品初始懸液或?qū)嶋H接種懸液的稀釋倍數(shù)。
4.1.6 大數(shù)值的估算:若所有稀釋度的檢測(cè)板上菌落數(shù)均大于300CFU,計(jì)數(shù)接近300CFU的檢測(cè)板上的菌落并計(jì)算出平均數(shù),其他檢測(cè)板可記錄為多不可計(jì)。結(jié)果計(jì)算式(3):
                           ∑C
                  NE = ——   •••••••••••••••••••(3)
                           nd
式中:
NE——每毫升或每克樣品中菌數(shù)的估算值;
∑C——兩個(gè)檢測(cè)板上菌落數(shù)之和;
n——檢測(cè)板的數(shù)量;
d——與樣品懸液相*的稀釋倍數(shù)。
5、結(jié)果報(bào)告
固體樣品以CFU/g為單位報(bào)告,液體樣品以CFU/mL為單位報(bào)告。
6、附加說(shuō)明
注意使用過(guò)的檢測(cè)板上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。

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