酶標儀實際上就是一臺變相光電比色計或分光光度計，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同。光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光，進入塑料微孔極中的待測標本。該單色光一部分被標本吸收，另一部分則透過標本照射到光電檢測器上，光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號，電信號經(jīng)前置放大，對數(shù)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進行數(shù)據(jù)處理和計算，后由顯示器和打印機顯示結(jié)果。微處理機還通過控制電路控制機械驅(qū)動機構(gòu)X方向和Y方向的運動來移動微孔板，從而實現(xiàn)自動進樣檢測過程。而另一些酶標儀則是采用手工移動微孔板進行檢測，因此省去了X,Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu)和控制電路，從而使儀器更小巧，結(jié)構(gòu)也更簡單。

光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。

檢測單位用OD值表示， OD是optical density(光密度)的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度， OD=log(1/trans)，其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則，OD值與光強度成下述關(guān)系:

E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度， Ιo 為在檢測物之前的光強度，Ι為從被檢測物出來的光強度。

OD值由下述公式計算:

c為檢測物的濃度 b為檢測物的厚度 a為摩爾因子在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長，在此波長下，此物質(zhì)能夠吸收多的光能量。如果選擇其它的波長段，就會造成檢測結(jié)果的不準確。因此，在測定檢測物時，我們選擇特定的波長進行檢測，稱為測量波長。但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們再選取一個參照波長，以消除這個不準確性。在參照波長下，檢測物光的吸收小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。

OD值由下述公式計算:

c為檢測物的濃度 b為檢測物的厚度 a為摩爾因子在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長，在此波長下，此物質(zhì)能夠吸收多的光能量。如果選擇其它的波長段，就會造成檢測結(jié)果的不準確。因此，在測定檢測物時，我們選擇特定的波長進行檢測，稱為測量波長。但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們再選取一個參照波長，以消除這個不準確性。在參照波長下，檢測物光的吸收小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。