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美國Zeta life-Advanced RNA 轉(zhuǎn)染試劑2025已更新
產(chǎn)品概述：
Advanced RNA轉(zhuǎn)染試劑操作說明書
產(chǎn)品貨號：AD300025
一、試劑盒組分
Advanced RNA轉(zhuǎn)染試劑： 貨號AD30
稀釋液： 貨號X-DS
二、注意事項(xiàng)
復(fù)合物可轉(zhuǎn)入含血清培養(yǎng)基中進(jìn)行轉(zhuǎn)染，24小時(shí)換液48小時(shí)收細(xì)胞
轉(zhuǎn)染用的含血清培養(yǎng)基里面不含雙抗培養(yǎng)基
使用高純度的siRNA有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率
建議轉(zhuǎn)染試劑用量為 0.1 µL/ pmol siRNA
siRNA推薦實(shí)驗(yàn)濃度為40 nM
儲存條件：4°C（拒絕凍融）有效期：1年
簡易操作說明
一、實(shí)驗(yàn)中核酸準(zhǔn)備要求
RNA 濃度20 uM /L。
二、操作流程
1、提1天接種細(xì)胞：保證轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞長至70-90%匯合度
2、稀釋轉(zhuǎn)染試劑：根據(jù)參考用量用稀釋液稀釋Advanced RNA™轉(zhuǎn)染試劑
3、加入siRNA溶液：向2中加入siRNA溶液，充分混勻
4、孵育形成復(fù)合物：siRNA與轉(zhuǎn)染試劑混勻后，室溫孵育20-30分鐘
注：為了達(dá)到更佳的轉(zhuǎn)染效果，您可以在37℃下孵育形成復(fù)合物
5、在細(xì)胞中加入復(fù)合物：根據(jù)參考用量在細(xì)胞中加入復(fù)合物
6、分析結(jié)果：細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)2-3天后檢測轉(zhuǎn)染效果
三、以細(xì)胞培養(yǎng)板為例進(jìn)行轉(zhuǎn)染試劑及RNA的用量梯度說明
培養(yǎng)器皿 | siRNA濃度 | 每孔體積 | 轉(zhuǎn)染試劑 | 轉(zhuǎn)染試劑 稀釋液 | 20µM siRNA | 培養(yǎng)基 |
96-well | 100 nM | 100 µL | 1 µL | 10 µL | 0.5 µL | 88.5 µL |
40 nM | 100 µL | 0.4 µL | 10 µL | 0.2 µL | 89.4 µL | |
20 nM | 100 µL | 0.2 µL | 10 µL | 0.1 µL | 89.7 µL | |
10 nM | 100 µL | 0.1 µL | 10 µL | 0.05 µL | 89.85 µL | |
24-well | 100 nM | 500 µL | 5 µL | 50 µL | 2.5 µL | 442.5 µL |
40 nM | 500 µL | 2 µL | 50 µL | 1 µL | 447 µL | |
20 nM | 500 µL | 1 µL | 50 µL | 0.5 µL | 448.5 µL | |
10 nM | 500 µL | 0.5 µL | 50 µL | 0.25 µL | 449.25 µL | |
12-well | 100 nM | 1 mL | 10 µL | 100 µL | 5 µL | 885 µL |
40 nM | 1 mL | 4 µL | 100 µL | 2 µL | 894 µL | |
20 nM | 1 mL | 2 µL | 100 µL | 1 µL | 897 µL | |
10 nM | 1 mL | 1 µL | 100 µL | 0.5 µL | 898.5 µL | |
6-well | 100 nM | 2 mL | 20 µL | 200 µL | 10 µL | 1770 µL |
40 nM | 2 mL | 8 µL | 200 µL | 4 µL | 1788 µL | |
20 nM | 2 mL | 4 µL | 200 µL | 2 µL | 1794 µL | |
10 nM | 2 mL | 2 µL | 200 µL | 1 µL | 1797 µL |
本產(chǎn)品僅用于科研。
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