美國(guó)Biozellen®基質(zhì)膠在小鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用

美國(guó)Biozellen®基質(zhì)膠在小鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用

一、應(yīng)用

•3D細(xì)胞球體培養(yǎng)試驗(yàn)

•小鼠皮下成瘤

•細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)

•適合用于3D細(xì)胞藥物篩檢平臺(tái)

•細(xì)胞生長(zhǎng)和分化

•代謝/毒理學(xué)研究

二、試劑盒組分

三、小鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備程序 

1. 將 A膠 (2X) (貨號(hào):B-P-00002-A) 置于37 ℃水浴槽回溫10分鐘，確認(rèn)*融解。

2. 將C緩沖溶液(10X) 貨號(hào):B-P-00002-C)與冰的無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)液 (例如: 無(wú)血清DMEM或內(nèi)含VEGF、heparin的無(wú)血清DMEM) 按1:4比例均勻混合配置。(例如:1 ml C緩沖溶液(10X) 與 4 ml 無(wú)血清DMEM混合，不可用PBS稀釋)

3. 將 A膠 (2X) 與約2*10⁶ cells/ml的癌細(xì)胞系懸浮液按1:1等比例均勻混合配置，癌細(xì)胞系懸浮液最終濃度約為10⁶ cells/ml。

4. 選用21-25 G的針頭 (避免破壞細(xì)胞)，抽取0.2-0.3 ml 預(yù)冷稀釋后的C緩沖溶液。(C緩沖溶液用于A膠成膠反應(yīng))

5. 使用步驟4的同一支針管，再抽取0.1-0.7 ml含細(xì)胞的A膠混合液，在冰上孵育五分鐘。

6. 以皮下注射方式注射0.3-1.0 ml至小鼠。(需一次注射完含C緩沖溶液的A膠混合液)

注1: 注射體積可依不同實(shí)驗(yàn)?zāi)康淖稣{(diào)整，若為血管生成研究注射體積需至少0.5 ml。

注2: 此步驟依實(shí)驗(yàn)需求可執(zhí)行或不執(zhí)行，若需呈現(xiàn)明顯的皮下注射隆起效果，可于注射完畢后，在小鼠注射部位冰敷5-10分鐘。

7. 培養(yǎng)一至三周后可摘取接種的腫瘤組織。

注3: 若為血管生成研究，應(yīng)注射含VEGF及heparin的A膠，以促進(jìn)血管生成。約三天后，可摘取含有新血管生成的腫瘤組織。

四、Biozellen®3D細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝

貨號(hào).    B-P-00002-2、B-P-00002-4、B-P-00002-10                

規(guī)格    2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit

Storage  4℃保存、 保存兩年

五、案例分享

A.形成3D腫瘤球體成功案例分享

B.Biozellen基質(zhì)膠被溶解后分離的完整3D細(xì)胞結(jié)構(gòu)照片

培養(yǎng)后的3D細(xì)胞球體， 在Biozellen基質(zhì)膠被試劑盒里面的

D Buffer溶解分離后仍然可以得到完整的3D細(xì)胞結(jié)構(gòu)