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當(dāng)前位置:云克隆(北京)生物科技有限公司>>細胞庫>> YADS-C-0087人肺腺癌細胞;LTEP-α-2
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號YADS-C-0087
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地北京市
更新時間:2024-04-30 16:24:40瀏覽次數(shù):836次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 1個T25瓶 |
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貨號 | YADS-C-0087 |
人肺腺癌細胞;LTEP-α-2
人肺腺癌細胞;LTEP-α-2
傳代方法:細胞wan全匯合時,倒掉舊液,加入消化液(0.25%yi蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細胞wan全脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉yi酶,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
郵購備注: 收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當(dāng)方式處理細胞。若有懸浮的細胞,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清,剛接到細胞時血清濃度可以在15%。本產(chǎn)品經(jīng)過了細菌、真菌、霉菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體檢測。
我們將為客服提供全面的細胞計數(shù)、細胞染色、(MTT)比色法、細胞培養(yǎng)、細胞污染、常規(guī)生物材料細胞毒性實驗等等細胞實驗技術(shù)服務(wù)。
細胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶,對細胞造成損害。
具體操作 (一)實驗前準(zhǔn)備: 1.將水浴鍋預(yù)熱至37℃ 2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。 3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。
(二)取出凍存管: 1.根據(jù)細胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細胞的編號。 2.從液氮罐中取出細胞盒,取出所需的細胞,同時核對管外的編號。
(三)迅速解凍: 1.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。 2.約1-2min后凍存管內(nèi)液體wan全溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。
(四)平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機中3000r/min 離心3min。
(五)制備細胞懸液: 1.吸棄上清液。 2.向離心管內(nèi)加入10ml培養(yǎng)液,吹打制成細胞懸液。 (六)細胞計數(shù): 細胞濃度以5×105/ml為宜。
(七)培養(yǎng)細胞 將復(fù)合細胞計數(shù)要求的細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細胞情況而定。
初學(xué)者易犯錯誤: 1.水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。 2.水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時間延長。 3.離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機損壞和細胞丟失。 4.一次復(fù)蘇細胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細胞交叉污染。
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