供貨周期 |
兩周 |
規(guī)格 |
1個T25瓶 |
貨號 |
YADS-C-0076 |
人肝癌細胞;HepG2
形態(tài)特性 上皮樣細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一15歲男性白人的肝細胞癌組織。模式染色體數(shù)為55條,有一條重排的1號染色體。此細胞對裸鼠沒有致瘤性。未檢測到HBV的基因組。
人肝癌細胞;HepG2
人肝癌細胞;HepG2
形態(tài)特性 上皮樣細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一15歲男性白人的肝細胞癌組織。模式染色體數(shù)為55條,有一條重排的1號染色體。此細胞對裸鼠沒有致瘤性。未檢測到HBV的基因組。
培養(yǎng)條件 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR Amelogenin:XY;CSF1PO:10,11;D13S317:9,13;D16S539:,13;D18S51:13,14;D19S433:15.2;D21S11:29,31;D2S1338:19,20;D3S1358:15,16;D5S818:11,12;D7S820:10;D8S1179:15,16;FGA:22,25;TH01:9;THOX:8,9;vWA:17;
同工酶 無
染色體 50-64
細胞特性:1)】人肝癌細胞;HepG2圖片組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞角蛋白-18(CK-18)免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌yi酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入wan全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。