GES-1人胃黏膜上皮細(xì)胞

GES-1人胃黏膜上皮細(xì)胞

運(yùn)輸及保存條件

活細(xì)胞常溫運(yùn)輸,接收后請(qǐng)立即放入細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

凍存細(xì)胞干冰運(yùn)輸,接收后請(qǐng)放入液氮中保存,或立即復(fù)蘇。

細(xì)胞特性

來(lái)源:胃粘膜。

形態(tài):上皮細(xì)胞樣。

培養(yǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)。

支原體、細(xì)菌、真菌檢測(cè)為陰性。

wan全培養(yǎng)液主要成分

DMEM + 10% fetal bovine serum +雙抗。

使用方法

細(xì)胞復(fù)蘇

1.從液氮或干冰中取出凍存管迅速放入37℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),在1分鐘內(nèi)使其wan全融化。

2.吸出細(xì)胞,800 g/min離心5分鐘,棄上清,加入適量wan全培養(yǎng)液重懸細(xì)胞后接種于25 cm2培養(yǎng)瓶中,置37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細(xì)胞傳代

1.當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%-90%融合時(shí),棄去培養(yǎng)上清,用PBS(不含鈣、鎂離子)洗細(xì)胞1-2次。

2.加2 ml 0.05% Trypsin-EDTA于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,當(dāng)細(xì)胞大部分變圓并脫落時(shí),加入1 mlwan全培養(yǎng)液終止消化。

3.輕輕吹打后吸出細(xì)胞,800 g/min離心5分鐘,棄上清,加入適量wan全培養(yǎng)液重懸細(xì)胞后按1:3比例接種于25 cm2培養(yǎng)瓶中,置37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細(xì)胞凍存

1.當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),棄去培養(yǎng)上清,用PBS(不含鈣、鎂離子)洗細(xì)胞1-2次。

2.加2 ml 0.05% Trypsin-EDTA于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,當(dāng)細(xì)胞大部分變圓并脫落時(shí),加入1 mlwan全培養(yǎng)液終止消化。

3.輕輕吹打后吸出細(xì)胞,800 g/min離心5分鐘,棄上清,加入適量?jī)龃嬉?90% fetalbovine serum + 10% DMSO)后重懸細(xì)胞。經(jīng)逐步降溫后轉(zhuǎn)入液氮凍存。