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奧林巴斯進(jìn)口顯微鏡 CKX53 常用于病理觀察,以下是其一般的病理觀察方法:
準(zhǔn)備工作
顯微鏡檢查:檢查奧林巴斯 CKX53 顯微鏡各部件是否正常,如光源是否能正常發(fā)光、物鏡和目鏡是否清潔無污損、調(diào)焦旋鈕等操作部件是否靈活等。
樣品準(zhǔn)備:將病理切片或涂片等標(biāo)本準(zhǔn)備好。確保切片厚度均勻、無裂痕,涂片要涂抹均勻、干燥固定良好。如果是組織切片,一般需經(jīng)過固定、脫水、透明、浸蠟、切片、染色等一系列處理,常用的染色方法如蘇木精 - 伊紅(HE)染色等,以增強(qiáng)細(xì)胞和組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)對(duì)比,便于觀察。
放置玻片:打開顯微鏡載物臺(tái)的壓片夾,將準(zhǔn)備好的病理玻片標(biāo)本平穩(wěn)放置在載物臺(tái)上,使標(biāo)本位于通光孔的中央,然后輕輕合上壓片夾固定玻片。
觀察操作
低倍鏡觀察
調(diào)焦:轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使載物臺(tái)上升,直到物鏡接近玻片標(biāo)本,但注意不要碰到玻片。然后通過目鏡觀察,同時(shí)反向轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使載物臺(tái)緩慢下降,直到能看到清晰的圖像為止。若圖像不夠清晰,可稍微轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋進(jìn)行微調(diào)。
掃視全貌:使用低倍物鏡(如 4 倍或 10 倍)對(duì)整個(gè)病理切片進(jìn)行全面掃視,觀察標(biāo)本的整體形態(tài)、組織結(jié)構(gòu),確定病變的大致部位和范圍,了解組織的正常結(jié)構(gòu)與異常改變的分布情況。
中倍鏡觀察
轉(zhuǎn)換物鏡:在低倍鏡下找到感興趣的區(qū)域后,將其移至視野中央,然后轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器,換用中倍物鏡(如 20 倍)。
進(jìn)一步觀察:此時(shí)圖像會(huì)放大,能更清晰地觀察組織和細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié),注意觀察細(xì)胞的大小、形態(tài)、排列方式,細(xì)胞核的大小、形狀、染色質(zhì)分布,細(xì)胞質(zhì)的顏色和質(zhì)地等,分析病變組織與周圍正常組織的差異。
高倍鏡觀察
再次調(diào)焦:換用高倍物鏡(如 40 倍或 60 倍)后,由于高倍鏡的工作距離較短,通常只需稍微轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋即可使圖像清晰。
細(xì)節(jié)觀察:在高倍鏡下仔細(xì)觀察細(xì)胞的細(xì)微結(jié)構(gòu),如核仁的大小和數(shù)量、核膜是否完整、細(xì)胞膜的形態(tài)、細(xì)胞器的形態(tài)和分布等,尋找細(xì)胞的病理改變特征,如細(xì)胞的變性、壞死、增生、化生等,以及是否存在病原體,如細(xì)菌、病毒包涵體等。對(duì)于一些特殊的病理結(jié)構(gòu)或細(xì)胞成分,可能還需要使用油鏡(如 100 倍)進(jìn)行更詳細(xì)的觀察。使用油鏡時(shí),需在玻片標(biāo)本上滴加一滴香柏油,將油鏡鏡頭浸入油中進(jìn)行觀察,觀察完畢后要用擦鏡紙蘸取適量二甲苯等有機(jī)溶劑擦拭鏡頭和玻片上的香柏油,以免影響下次使用。
記錄與分析
繪圖或拍照:可以使用顯微鏡自帶的成像系統(tǒng)對(duì)觀察到的典型病理圖像進(jìn)行拍照記錄,也可通過手繪的方式繪制病理圖像,標(biāo)注出關(guān)鍵的結(jié)構(gòu)和病變特征,便于后續(xù)的分析和討論。
結(jié)果分析:根據(jù)觀察到的病理形態(tài)學(xué)改變,結(jié)合臨床資料和其他檢查結(jié)果,對(duì)病變的性質(zhì)、類型、程度等進(jìn)行綜合分析和判斷,做出病理診斷。同時(shí),還可以與正常組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)進(jìn)行對(duì)比,分析病變產(chǎn)生的可能原因和機(jī)制。
在使用奧林巴斯 CKX53 顯微鏡進(jìn)行病理觀察時(shí),操作人員需要具備扎實(shí)的病理學(xué)知識(shí)和豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),嚴(yán)格按照操作規(guī)范進(jìn)行操作,以確保觀察結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
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