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Trypsin1:250 胰蛋白酶1:250

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  • 北京諾博萊德科技有限公司
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【簡(jiǎn)單介紹】

說(shuō)明：可用于制備單細(xì)胞懸浮液。
CAS＃：9002-07-7
性狀：由豬胰提取而得的一種肽鏈內(nèi)切酶，淡黃色粉末。不溶于乙醇、甘油、氯仿。等電點(diǎn)pI 10.5。Ca2+對(duì)酶活性有穩(wěn)定作用；重金屬離子、有機(jī)磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制劑對(duì)其活性有強(qiáng)烈抑制
特性：糜蛋白酶(U/mg)≤75
水分(%) ≤5.0 胰島素(U/mg) >250
R：36/37/38-42/43 S：36/37/

【詳細(xì)說(shuō)明】

Trypsin1:250 胰蛋白酶1:250 說(shuō)明：可用于制備單細(xì)胞懸浮液。

CAS＃：9002-07-7
Trypsin1:250 胰蛋白酶1:250性狀：由豬胰提取而得的一種肽鏈內(nèi)切酶，淡黃色粉末。不溶于乙醇、甘油、氯仿。等電點(diǎn)pI 10.5。Ca2+對(duì)酶活性有穩(wěn)定作用；重金屬離子、有機(jī)磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制劑對(duì)其活性有強(qiáng)烈抑制
特性：糜蛋白酶（U/mg）≤75
水分（%） ≤5.0 胰島素（U/mg） >250
R：36/37/38-42/43 S：36/37/39
使用說(shuō)明：胰蛋白酶在用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，可用PBS溶解成濃度
為0.25%，也可以加入0.02%EDTA ，過(guò)濾除菌后使用，溶
液為-20℃保存
儲(chǔ)存條件：2-8℃
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溶解方法1：用90ML無(wú)Ca、Mg離子PBS溶解胰蛋白酶，再加該P(yáng)BS至100ML（該酶溶解較難，必要時(shí)在4度過(guò)夜以便溶解）。用時(shí)調(diào)PH7.2左右，用5.6%NaCO3調(diào)
溶解方法2：維持反應(yīng)鍋內(nèi)溶液80℃的溫度至少半小時(shí)，然后由夾層通入自來(lái)水降低鍋內(nèi)溶液溫度至 50 ℃，按 1∶30的酶／底物比加入需要量的胰蛋白酶，在攪拌器連續(xù)攪拌下開始酶解反應(yīng)，期間調(diào)整通入反應(yīng)鍋夾層的蒸汽量使溫度維持在50℃。酶解反應(yīng)過(guò)程中，為保證胰蛋白酶的zui大生物活性使反應(yīng)液的pH維持在8．0，這就需要不斷在反應(yīng)液中加入NaOH稀溶液。自加入胰蛋白酶起6h后酶解反應(yīng)結(jié)束
溶解方法3：準(zhǔn)確稱取NaCl 8.00g，KCl 0.40g、Na2HPO4·7H2O 0.09g、KH2PO4 0.06g、酚紅0.01g、NaHCO3 0.35g，溶解于約800mL五蒸水中，充分溶解后定容至1000mL，分裝，滅菌備用，制成D-hanks液。準(zhǔn)確稱取胰蛋白酶0.125g，溶解于100mL D-hanks液中，于4℃過(guò)夜，過(guò)濾分裝，-20℃保存?zhèn)溆?/span>
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