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各種動(dòng)物外周血和臟器組織NK細(xì)胞分離試劑盒操作說明：

Store at: RT° C         Size :2X200ml/Kit

試劑盒內(nèi)容

試劑：全血及組織勻漿稀釋液 200ml

試劑：細(xì)胞洗滌液 200ml

試劑B： 200ml

試劑D： 200ml

試劑E： 200ml

說明書 1份

操作方法（操作全過程應(yīng)在20-25度環(huán)境下進(jìn)行）

1. 取 1ml肝素抗凝血與全血及組織勻漿稀釋液（或胎牛血清或人血清懸起勻漿的細(xì)胞 1X107/ml）1：1混合后再按2:1的比例與E液混合，20℃-25℃靜置3分鐘，吸取上層渾濁液，棄去大部分紅細(xì)胞。在10ml或15ml玻璃離心管中依次小心加入B、D兩種液體各1ml,制成梯度界面（液面分層一定清晰）。將吸取的上層渾濁液疊加于D液之液面上，以400g（約1500轉(zhuǎn)/分）離心15分鐘（半徑15cm水平轉(zhuǎn)子），渾濁液與D液間的界面為NK細(xì)胞層.（提取率約為80%）。

2.  吸出NK細(xì)胞層以細(xì)胞洗滌液洗滌三次備用。細(xì)胞放入含細(xì)胞洗滌液（Cat#2010X1118）4-5毫升的試管中，充分混勻后，以500g（約1800轉(zhuǎn)/分）離心20分鐘。沉淀經(jīng)反復(fù)洗2次即得所需細(xì)胞。

分離圖例：

注意

TBD 實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞分離培養(yǎng)基是敏光型的。這種培養(yǎng)基在運(yùn)輸和貯藏過程中應(yīng)避光保溫。由于各品牌離心機(jī)的性能不同，國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異，可能影響分離效果，用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)，調(diào)節(jié)離心的時(shí)間，摸索*的分離條件（具體分離條件各實(shí)驗(yàn)室自定）。組織，血液，細(xì)胞要求新鮮，避免冷凍和冷藏。

貯藏

18-25℃避光保存。啟封后置4℃保存。本品為真空包裝，未啟封前置于10℃以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。

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