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產(chǎn)品名稱(chēng)：兔氣管上皮細(xì)胞

組織來(lái)源：氣管

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔氣管上皮分離自氣管組織；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與環(huán)狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體（相當(dāng)胸骨角平面）交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱(chēng)為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成，有彈性，軟骨為“C”字形的軟骨環(huán)，缺口向后，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來(lái)，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開(kāi)狀態(tài)。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出，以?xún)艋氲臍怏w。氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線，不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞，還作為效應(yīng)細(xì)胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng)。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性，因此，在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔氣管上皮采用-混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔氣管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細(xì)胞如何處理？

1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。

5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

肽酶抑制因子3   英文名稱(chēng)：   Human Peptidase Inhibitor 3   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   PI-3

過(guò)氧化物酶體增殖物活化受體γ   英文名稱(chēng)：   Human Peroxisome Proliferators Activated Receptor γ   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   PPARγ

0酸化SMAD2/3抗體   英文名稱(chēng)：   Human Phosphor Mothers Against Decapeaplegic Homolog 2/3 aibody   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   PSMAD2/3 Ab

0酸化核因子κB   英文名稱(chēng)：   Human phosphor-Nuclear Factor kappa B   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   pNFκB

豌豆凝集素(PSA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat cardiac anscription factor GATA4 大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4

Humanai-insulieceptoraibody,AIRAELISAKit 人抗胰島素受體抗體(AIRA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCreatineKinaseMBisoenzyme,CK-MB試劑盒人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織C-TAK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanProstaticAcidPhosphatase，PAPELISAKit人前列腺酸性0酸酶(PAP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

半胱蛋白酶抑制劑9樣蛋白抗體

卵泡刺激素結(jié)合蛋白2抗體

APOA1重組小鼠 ApoA1 蛋白 Protein

蛋白二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)重組蛋白 Recombinant Protein Disulfide Isomerase (PDI)

RPRD1B重組人 RPRD1B 蛋白 Protein

IFNL1 Protein Human 重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白

SELL Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白

AATK peptide 細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪激酶抗原 0.5mgAATK peptide 細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪激酶抗原

IFNL1 Protein Human 重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白

OMG重組小鼠 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-245, His 標(biāo)簽) Protein

COLEC12 Protein Rat 重組大鼠 CLP1 / COLEC12 蛋白

CXCL10重組人 CXCL10 / Crg-2 蛋白 Protein

兔氣管上皮細(xì)胞大鼠聚集蛋白聚糖(AGC)試劑盒 ，英文名： AGC ELISA Kit

Monkey Vascuoar endothelial cell growth factor receptor -3 (VEGFR-3) ELISA Kit血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3)試劑盒

RatterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit 大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFree-T3ELISAKit大鼠游離三甲狀腺原

細(xì)胞活力藍(lán)色熒光試劑盒50次

RatPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit大鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)試劑盒規(guī)格：96T/48T