實(shí)驗(yàn)介紹

4D-蛋白質(zhì)組學(xué)是基于新一代timsTOF Pro質(zhì)譜儀，通過捕集離子淌度（TIMS）與同步累積連續(xù)碎裂（PASEF）掃描模式進(jìn)行差異定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究。該技術(shù)核心是在傳統(tǒng)3D分離（保留時(shí)間、質(zhì)荷比、離子強(qiáng)度）基礎(chǔ)上，增加肽段的碰撞截面積（CCS），實(shí)現(xiàn)第4維度（離子淌度）的分離檢測。 4D-DIA蛋白質(zhì)組學(xué)是基于timsTOF Pro離子淌度平臺(tái)的新一代DIA技術(shù)，通過數(shù)據(jù)非依賴采集-同步累積連續(xù)碎裂（diaPASEF）掃描模式進(jìn)行差異定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析。將DIA技術(shù)與基于timsTOF Pro上的diaPASEF技術(shù)相結(jié)合，具有高掃描速度和高靈敏度優(yōu)勢的同時(shí)，外加第四維離子淌度分離，使DIA數(shù)據(jù)在采集時(shí)不犧牲窗口循環(huán)速度的同時(shí)，降低譜圖復(fù)雜度和提高離子利用率，實(shí)現(xiàn)了蛋白質(zhì)組學(xué)在覆蓋深度、靈敏度、通量方面的全面性提升。

實(shí)驗(yàn)流程：

應(yīng)用方向

? 臨床微量樣本檢測方式，如：外泌體、FFPE石蠟切片、活檢穿刺組織等

? 臨床大隊(duì)列樣本分析，如腫瘤、心血管等重大疾病精準(zhǔn)分型

? 作物群體性狀等大規(guī)模樣本研究，如育種品系、脅迫干預(yù)等

? 臨床生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)：DIA接近MRM的定量能力，實(shí)現(xiàn)標(biāo)志物篩選與初步驗(yàn)證過程合二為一

? 生物樣本信息庫構(gòu)建：DIA可實(shí)現(xiàn)生物信息的完整保存，為后續(xù)回溯分析提供保障。藥物應(yīng)答、基因敲除/過表達(dá)的蛋白表達(dá)譜分析

數(shù)據(jù)分析

技術(shù)優(yōu)勢

? 4D技術(shù)加持，更加適合微量樣本

? 克服標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在樣本數(shù)量上的限制，靈活方便

? 采用布魯克的timsTOF Pro質(zhì)譜平臺(tái)，檢測速度提升近一倍