規(guī)格：1×10⁶

儲存條件：活細(xì)胞儲存于25℃ ~ 37℃，收到后請立即放入CO₂培養(yǎng)箱。

凍存細(xì)胞暫存于-80℃冰箱，2周有效期；液氮可*儲存。

產(chǎn)品簡介：

心肌細(xì)胞主要由具備自主電生理活動能力的心室肌樣細(xì)胞及少量心房肌和竇房結(jié)樣細(xì)胞組成，可表達(dá)常規(guī)的心肌特異性基因，包括多種收縮蛋白和離子通道蛋白；具備經(jīng)典的心肌細(xì)胞電生理活性，能夠?qū)﹄娚砗蜕锘瘜W(xué)刺激做出心肌細(xì)胞的常規(guī)反應(yīng)。本產(chǎn)品是一款即用型高純度的心肌細(xì)胞產(chǎn)品，采用埃德斯生物（iMedCell®）的高效心肌定向分化、純化產(chǎn)品生產(chǎn)而成。以電生理和鈣轉(zhuǎn)導(dǎo)信號記錄為例，本產(chǎn)品可以作為醫(yī)療科研、新藥篩選、毒理學(xué)測定及其他生理學(xué)研究的理想工具；由搏動和免疫熒光染色的細(xì)胞比例證實(shí)，本產(chǎn)品細(xì)胞純度可達(dá)99%以上。

包含材料：

培養(yǎng)材料準(zhǔn)備

基質(zhì)膠包被培養(yǎng)皿/瓶：即用型基質(zhì)膠37℃包被1h，室溫平衡30min或2 ~ 8℃靜置過夜備用。如果暫時(shí)不用，可用Parafilm封口后2 ~ 8℃ 儲存，并于1周內(nèi)使用，保存期間基質(zhì)膠工作液需始終保持*覆蓋皿底。

心肌細(xì)胞復(fù)蘇與維持：

1. 室溫平衡心肌維持培養(yǎng)基，取出包被過基質(zhì)膠的培養(yǎng)皿/瓶，室溫平衡30 min，吸去基質(zhì)膠并加入適量心肌維持培養(yǎng)基，置于5% CO₂的37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中。

2. 37℃解凍細(xì)胞，快速搖晃使細(xì)胞融化至僅剩一小塊冰晶（避免凍存管蓋接觸水面），迅速取出并用70%酒精消毒凍存管外表面，轉(zhuǎn)移至無菌操作臺中。

3. 用 1ml 移液器小心的將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至一個(gè)新的 15ml 離心管，避免劇烈吹吸。

4. 用 1ml 心肌接種培養(yǎng)基潤洗凍存管，以收集剩余細(xì)胞。然后逐滴加入含有細(xì)胞懸液的 15ml 離心管，滴加過程中不斷輕搖混勻。

5. 200Xg離心5 min。棄去上清液，用心肌接種培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，輕柔吹打混勻，并接種到準(zhǔn)備好的培養(yǎng)皿/ 瓶中，水平十字振動使細(xì)胞均勻分布。

6. 5% CO₂的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每48h更換心肌維持培養(yǎng)基。

注：不同培養(yǎng)體系接種細(xì)胞數(shù)量

心肌細(xì)胞再接種

1. 如果需要將心肌細(xì)胞按合適密度接種到新的培養(yǎng)皿/瓶中，可對心肌細(xì)胞進(jìn)行再接種，再接種操作會導(dǎo)致10-15%左右的細(xì)胞損失。

2. 室溫平衡心肌維持培養(yǎng)基、PBS溶液和人心肌細(xì)胞消化液，取出包被過基質(zhì)膠的培養(yǎng)皿/瓶，吸去包被液并加入適量心肌接種培養(yǎng)基，置于5% CO₂的37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中。

3. 吸走原有心肌維持培養(yǎng)基，并且加入PBS溶液洗一次。加入人心肌細(xì)胞消化液（ME-1001009）使之*覆蓋皿/瓶底。

4. 37℃孵育7-10 min，顯微鏡下觀察到大部分細(xì)胞相互分離，表面細(xì)胞消化時(shí)間理想。

5. 用移液器扇形吹打培養(yǎng)皿/瓶底，使皿/瓶底貼附的心肌細(xì)胞脫落，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至15ml離心管中。

6. 200Xg離心5 min，棄去上清，用心肌維持培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，輕柔吹打混勻，并接種到準(zhǔn)備好的培養(yǎng)皿/瓶中，水平十字振動使細(xì)胞均勻分布。

7. 5% CO₂的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每48h更換心肌維持培養(yǎng)基，維持培養(yǎng)。