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各種動(dòng)物外周血和臟器組織單核細(xì)胞分離試劑盒操作說明:
Store at: RT° C Size :200ml
試劑盒內(nèi)容
試劑:全血及組織勻漿稀釋液 100ml
試劑:細(xì)胞洗滌液 100ml
試劑A: 100ml
試劑D: 100ml
說明書 1份
操作方法(操作全過程應(yīng)在20-25度環(huán)境下進(jìn)行)
1,在10ml或15ml玻璃離心管中依次小心加入A、D 2種液體各2ml,制成梯度界面(各液面分層一定清晰)。
2, 取 1ml肝素抗凝血與全血及組織勻漿稀釋液(或胎牛血清或人血清懸起勻漿的細(xì)胞 1X107/ml)1:1混合后于D液上重疊,以1000-1500rpm /min離心40min,在血漿與D液的界面為單核細(xì)胞層.(提取率約為80%)。
3,吸出單核細(xì)胞層以細(xì)胞洗滌液洗滌三次備用。
細(xì)胞放入含細(xì)胞洗滌液(Cat#:2010X1118)4-5毫升的試管中,充分混勻后,以1500-2000轉(zhuǎn)/分離心10-30分鐘。沉淀經(jīng)反復(fù)洗2次即得所需細(xì)胞。
注意
TBD 實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞分離培養(yǎng)基是敏光型的。這種培養(yǎng)基在運(yùn)輸和貯藏過程中應(yīng)避光保溫。由于各品牌離心機(jī)的性能不同,國(guó)內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù),調(diào)節(jié)離心的時(shí)間,摸索*的分離條件(具體分離條件各實(shí)驗(yàn)室自定)。組織,血液,細(xì)胞要求新鮮,避免冷凍和冷藏。
貯藏
18-25℃避光保存。啟封后置4℃保存。本品為真空包裝,未啟封前置于10℃以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。
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