細(xì)胞劃痕實驗是一種簡單且經(jīng)濟的體外細(xì)胞實驗方法，主要用于評估細(xì)胞在二維空間中的水平遷移能力。它的基本原理是：在細(xì)胞單層上人為制造一道“劃痕”，然后觀察細(xì)胞如何遷移以“修復(fù)”這一劃痕，從而判斷細(xì)胞的遷移能力。這一過程不僅與胚胎發(fā)育過程中器官的形成、機體傷口的愈合過程、免疫應(yīng)答過程等生理過程緊密相關(guān)，而且在癌癥研究中尤為關(guān)鍵，因為癌細(xì)胞的遷移是腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟，這也是實體瘤患者死亡的主要原因之一^[1]。因此，研究細(xì)胞的遷移行為、評估細(xì)胞的遷移能力意義重大。

1

能模擬體內(nèi)細(xì)胞遷移過程；

2

保留了細(xì)胞外基質(zhì)和胞間連接；

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可與活細(xì)胞成像結(jié)合，實時監(jiān)測細(xì)胞遷移過程；

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操作簡單、成本低，適合大多數(shù)實驗室開展。

1

相較其他幾種常用檢測細(xì)胞遷移的實驗，細(xì)胞劃痕實驗中細(xì)胞長成單層細(xì)胞和劃痕愈合需要較長時間；

2

細(xì)胞劃痕實驗常用培養(yǎng)皿、6孔板或12孔板培養(yǎng)細(xì)胞，這導(dǎo)致細(xì)胞和培養(yǎng)基的使用量較大，對于需要使用難以獲取的原代細(xì)胞或昂貴化學(xué)試劑的實驗不適用；

3

在細(xì)胞劃痕實驗中無法模擬化學(xué)梯度，無法替代Boyden小室法等其他具有趨化性檢測能力的實驗方法。

為了保證在不同時間點進(jìn)行圖像采集時能獲得相同的視野，需事先在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板的底部用極細(xì)的記號筆畫線（如圖1）或使用剃須刀片輕輕蝕刻培養(yǎng)容器底部作為參考點的標(biāo)記。

圖1. 六孔板畫線示意圖