MCE 鏈霉親和素磁珠用于生物素化核酸、生物素化抗體的分離和檢測 | MCE
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鏈霉親和素磁珠
MCE 國際站:Streptavidin Magnetic Beads
品牌:MedChemExpress (MCE)
貨號:HY-K0208
中文名稱:鏈霉親和素磁珠
存儲條件:4°C,2年請勿離心、干燥或冷凍磁珠。
產(chǎn)品活性:MCE 鏈霉親和素磁珠用于生物素化核酸、生物素化抗體或其他生物素化配體和靶分子的分離和檢測。
生物活性:MCE 鏈霉親和素磁珠使用納米表面生物技術(shù)將重組中性鏈霉親和素共價偶聯(lián)到超順磁性磁珠微球表面,形成單分子固定層,可用于生物素化核酸、生物素化抗體或其他生物素化配體和靶分子的分離和檢測。由于具有單層的鏈霉親和素,其表面的絕大多數(shù)生物素結(jié)合位點在空間上不僅可以結(jié)合游離生物素,而且還可以結(jié)合生物素化的配體/靶標,使用簡單有效。 1. 載量高 2. 非特異性低/p> 3. 樣品損失少 4. 即開即用
描述及優(yōu)勢:
MCE 鏈霉親和素磁珠使用納米表面生物技術(shù)將重組中性鏈霉親和素共價偶聯(lián)到超順磁性磁珠微球表面,形成單分子固定層,可用于生物素化核酸、生物素化抗體或其他生物素化配體和靶分子的分離和檢測。由于具有單層的鏈霉親和素,其表面的絕大多數(shù)生物素結(jié)合位點在空間上不僅可以結(jié)合游離生物素,而且還可以結(jié)合生物素化的配體/靶標,使用簡單有效。
1. 載量高
2. 非特異性低
3. 樣品損失少
4. 即開即用
操作流程:1. 固定化核酸 1) 將磁珠充分混懸,可置于混合器上渦旋振蕩 20 秒,取 100 μL 磁珠到新的 1.5 mL EP 管中,置于磁力架,磁性分離,棄上清液。注:用戶可根據(jù)生物素化分子的使用量,參考磁珠的載量,計算需取用的磁珠體積,建議生物素化分子的加入量為磁珠載量的 1-2 倍,使磁珠結(jié)合飽和。2) 加入1 mL Wash Buffer I,充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程:加入對應(yīng)的buffer到EP 管中,蓋上管蓋,渦旋振蕩磁珠15秒,磁性分離,棄上清。重復(fù)以上步驟1次。3) 加入 500 μL 用 Wash Buffer I 稀釋的生物素化核酸(使磁珠濃度為 2 mg/mL),充分振蕩混懸,置于旋轉(zhuǎn)混合儀上孵育(室溫, 30 分鐘;4°C, 2 小時)。4) 磁性分離,將上清液移至新的 EP 管中,以備后續(xù)使用。5) 加入1 mL Wash Buffer I,充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程:加入對應(yīng)的buffer到EP 管中,蓋上管蓋,渦旋振蕩磁珠15秒,磁性分離,棄上清。重復(fù)以上步驟1次。注:可通過測定反應(yīng)前后核酸的濃度,計算結(jié)合到磁珠上的核酸量。2. 固定化抗體/蛋白 1) 將磁珠充分混懸,可置于混合器上渦旋振蕩 20 秒,取 100 μL 磁珠到新的 1.5 mL EP 管中,置于磁力架,磁性分離,棄上清液。注:用戶可根據(jù)生物素化分子的使用量,參考磁珠的載量,計算需取用的磁珠體積,建議生物素化分子的加入量為磁珠載量的 1-2 倍,使磁珠結(jié)合飽和。2) 加入1 mL Wash Buffer II,充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程:加入對應(yīng)的buffer到EP 管中,蓋上管蓋,渦旋振蕩磁珠15秒,磁性分離,棄上清。重復(fù)以上步驟1次。3) 加入 1 mL 用 Wash Buffer II 稀釋的生物素化抗體/蛋白(使磁珠濃度為1 mg/mL),充分振蕩混懸,置于旋轉(zhuǎn)混合儀上旋轉(zhuǎn)孵育(室溫, 60 分鐘;4°C, 4 小時)。4) 磁性分離,將上清液移至新的 EP 管中,以備后續(xù)使用。5) 加入1 mL Wash Buffer II,充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程:加入對應(yīng)的buffer到EP 管中,蓋上管蓋,渦旋振蕩磁珠15秒,磁性分離,棄上清。重復(fù)以上步驟4次。3. 洗脫 3.1 生物素標記核酸的洗脫步驟:向磁珠中加入 50-100 μL Elution BufferⅠ,65°C 孵育 5 分鐘或 90°C 孵育 2 分鐘,置于磁力架,磁性分離,收集上清。3.2 生物素標記抗體/蛋白的洗脫a 變性洗脫法:此方法洗脫的樣品適用于 SDS–PAGE 檢測。步驟:向磁珠中加入 50–100 μL 1 × SDS-PAGE Loading Buffer 混合均勻, 95°C 加熱 5 分鐘。置于磁力架,分離磁珠,收集上清,進行 SDS-PAGE 檢測。注:如果選擇變性洗脫,那么洗脫液將包含鏈霉親和素單體和聚體、生物素標記抗體或蛋白。b 非變性洗脫法:此方法洗脫的樣品保持原有的生物活性,可用于后期功能分析。步驟:向磁珠中 50–100 μL Elution Buffer Ⅱ,室溫孵育 5–10 分鐘。置于磁力架,分離磁珠,收集上清至新的 EP 管,并立即滴入總體積 1/10 體積的中和緩沖液 (0.1 M NaOH),將洗脫產(chǎn)物 pH 調(diào)節(jié)至中性,樣品用于后期功能分析。注:注:如果選擇非變性洗脫,酸性條件下鏈霉親和素可能會脫落,需注意孵育時間不要超過 10 分鐘;酸性洗脫液能破壞大部分的抗體與抗原的相互作用,但為了更好的洗脫效果,可預(yù)先用 1 mL 0.1% Tween-20 的水溶液洗滌磁珠 1 次。
熱銷產(chǎn)品:Bimekizumab | WM-8014 | 5'-Methylthioadenosine | Teriparatide | Prexasertib | p-SCN-Bn-DOTA | Palivizumab | Nicotinamide riboside (chloride) | CCR2 antagonist 1 | PDK4-IN-1 (hydrochloride)
Trending products:Recombinant Proteins | Bioactive Screening Libraries | Natural Products | Fluorescent Dye | PROTAC | Isotope-Labeled Compounds | Oligonucleotides
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