酶抑制率法檢測(cè)農(nóng)藥殘留有一定準(zhǔn)確性,但也受多種因素影響,具體分析如下:
特定農(nóng)藥檢測(cè)針對(duì)性強(qiáng):對(duì)于有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥,酶抑制率法具有良好的檢測(cè)效果。這是因?yàn)檫@兩類農(nóng)藥的作用機(jī)制就是抑制乙酰膽堿酯酶的活性,與酶抑制率法的檢測(cè)原理高度契合。只要樣品中存在這兩類農(nóng)藥,基本都能通過(guò)酶活性的變化被檢測(cè)出來(lái),在已知農(nóng)藥種類的篩查中準(zhǔn)確性較高。
方法原理科學(xué)可靠:酶抑制率法基于酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)原理,通過(guò)檢測(cè)酶活性被抑制的程度來(lái)間接反映農(nóng)藥殘留量。在理想條件下,農(nóng)藥濃度與酶抑制率之間存在明確的劑量 - 反應(yīng)關(guān)系,符合一定的數(shù)學(xué)模型,如線性關(guān)系或指數(shù)關(guān)系等,這為準(zhǔn)確檢測(cè)提供了科學(xué)依據(jù)。
大量實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證可行:經(jīng)過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)和實(shí)際應(yīng)用驗(yàn)證,酶抑制率法在一定范圍內(nèi)能夠較為準(zhǔn)確地檢測(cè)出農(nóng)藥殘留情況。許多研究機(jī)構(gòu)和檢測(cè)部門都將其作為一種常規(guī)的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法,并且在長(zhǎng)期的實(shí)踐中積累了豐富的經(jīng)驗(yàn),證明了該方法在合適的條件下可以獲得可靠的檢測(cè)結(jié)果。
樣品基質(zhì)干擾:實(shí)際樣品的基質(zhì)復(fù)雜多樣,如蔬菜、水果等樣品中的色素、維生素、多酚類物質(zhì)等可能會(huì)與酶或底物發(fā)生相互作用,影響酶促反應(yīng)的進(jìn)行,從而干擾檢測(cè)結(jié)果。例如,一些富含多酚的樣品可能會(huì)非特異性地抑制酶的活性,導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果;而某些具有還原性的物質(zhì)可能會(huì)與反應(yīng)產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng),影響檢測(cè)信號(hào)的準(zhǔn)確性。
酶的活性差異:不同來(lái)源、批次的酶,其活性可能存在較大差異。即使是同一來(lái)源的酶,在不同的保存條件和使用時(shí)間下,活性也會(huì)發(fā)生變化。酶活性的不穩(wěn)定會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的波動(dòng),影響檢測(cè)的準(zhǔn)確性。比如,酶在保存過(guò)程中如果溫度、濕度等條件不合適,可能會(huì)使酶變性失活,從而使檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)偏差。
檢測(cè)條件的影響:酶促反應(yīng)受溫度、pH 值、反應(yīng)時(shí)間等多種因素的影響。在實(shí)際檢測(cè)中,如果這些條件不能嚴(yán)格控制在最佳范圍內(nèi),就會(huì)導(dǎo)致酶活性不能充分發(fā)揮,進(jìn)而影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。例如,溫度過(guò)高或過(guò)低都會(huì)使酶的活性降低,使檢測(cè)結(jié)果偏低或偏高;反應(yīng)時(shí)間過(guò)短,農(nóng)藥與酶可能沒(méi)有充分反應(yīng),導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。
其他農(nóng)藥的交叉反應(yīng):雖然酶抑制率法主要針對(duì)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥,但一些其他類型的農(nóng)藥或化學(xué)物質(zhì)也可能對(duì)膽堿酯酶有一定的抑制作用,從而產(chǎn)生交叉反應(yīng),干擾檢測(cè)結(jié)果,造成誤判。比如,某些擬-除-蟲-菊-酯-類農(nóng)藥在高濃度下也可能對(duì)酶有一定的抑制效果,導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)偏差。