QKine重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF-7)蛋白(Qk046)的應(yīng)用和活性檢測(cè)分析
角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF),也稱為成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-7(FGF-7),是大FGF家族的一部分,與FGF-3、FGF-10和FGF-22一起,是FGF-7亞家族的成員。該亞家族僅由間充質(zhì)分泌,并特異性激活存在于上覆上皮中的FGFR1(FGFR1b)和FGFR2(FGFR2b)的“b”亞型[1],這些受體的KGF通過(guò)FGFR2的IIIb剪接形式起作用。KGF是腎臟、胸腺和海馬發(fā)育所必需的[2]。KGF在傷口愈合中也起著重要作用[3],這一作用在生物工程皮膚研究中得到了體現(xiàn)[3]。KGF蛋白已被用于產(chǎn)生許多類(lèi)器官,包括肺、乳腺、肝臟和膀胱[2]。
Qkine人FGF-7/KGF是一種高純度、生物活性19kDa的蛋白質(zhì),不含動(dòng)物來(lái)源(AOF)和載體蛋白(CF)。
艾美捷QKine重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF-7)蛋白(Qk046):
摘要:高純度FGF-7/KGF蛋白(UniProt編號(hào):P21781)
純度 >98%,通過(guò)SDS-PAGE定量密度分析測(cè)定
分子量:19 kDa
表達(dá)系統(tǒng):大腸桿菌(E. coli)
無(wú)動(dòng)物源成分(AOF)且無(wú)載體蛋白
在英國(guó)劍橋的實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)
凍干自PBS緩沖液
復(fù)溶方法:在水中復(fù)溶至>100 µg/ml,制備單次使用分裝,如需可添加載體蛋白,然后在-20℃或-80℃冷凍保存
推薦應(yīng)用:
氣道、乳腺、肝細(xì)胞和泌尿道類(lèi)器官培養(yǎng)
進(jìn)一步質(zhì)量檢測(cè):
質(zhì)譜分析:?jiǎn)我晃锓N,具有預(yù)期質(zhì)量
內(nèi)毒素:<0.005 EU/µg蛋白(低于檢測(cè)水平)
從原瓶回收率:>95%
FGF-7(KGF)活性測(cè)定
使用Promega血清反應(yīng)元件熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)(*)在轉(zhuǎn)染的MCF-7細(xì)胞中測(cè)定FGF-7(KGF)活性。細(xì)胞用KGF的系列稀釋液處理4小時(shí)(每組三個(gè)重復(fù))。通過(guò)測(cè)量螢火蟲(chóng)熒光素酶活性并歸一化到對(duì)照組的海腎熒光素酶活性來(lái)評(píng)估。EC?? = 92 pM(1.75 ng/mL)。數(shù)據(jù)來(lái)自Qk046批次#104314。*Promega pGL4.33[luc2P/SRE/Hygro] #E1340
SDS-PAGE分析
在非還原(NR)條件下,KGF蛋白以19 kDa單體和38 kDa二聚體形式遷移;在還原(R)條件下,遷移為19 kDa。未見(jiàn)其他污染蛋白條帶。3 µg純化重組蛋白通過(guò)15%(w/v)SDS-PAGE在還原(+β-巰基乙醇,R)和非還原(NR)條件下分離,并用考馬斯亮藍(lán)R250染色。數(shù)據(jù)來(lái)自Qk046批次#104314。
文獻(xiàn)參考:
Generation of human iPSC-derived pancreatic organoids to study pancreas development and disease
bioRxiv preprint on 25 October 2024 by Darrigrand, J. et al.
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