歐盟GMP附錄1于2022年8月進(jìn)行了修訂，以反映藥品監(jiān)管和生產(chǎn)環(huán)境的變化，并滿足作為污染控制策略（CCS）一部分加強(qiáng)工藝了解的需求。附錄1對設(shè)備污染控制策略的關(guān)注圍繞清潔計(jì)劃展開。清潔驗(yàn)證分析方法的選擇為通過實(shí)施過程分析技術(shù)（PAT）（如細(xì)菌內(nèi)毒素、微生物限度、總有機(jī)碳TOC和電導(dǎo)率的旁線或在線檢測）來提高對工藝過程的理解提供了一個機(jī)會。

清潔驗(yàn)證可能令人畏懼，尤其是在對各種污染源進(jìn)行大量檢測以及需要自信地做出會對生產(chǎn)時間和產(chǎn)品質(zhì)量造成影響的決策時。然而，使用PAT進(jìn)行清潔驗(yàn)證，工藝過程控制和理解得到增強(qiáng)，可進(jìn)行實(shí)時決策，并且使分析檢測變得更快、更簡單。制藥企業(yè)可以大程度地減少動手時間，減少Q(mào)C隊(duì)列中的實(shí)驗(yàn)室樣品數(shù)量，并減少執(zhí)行檢測所需的分析人員培訓(xùn)量。旁線或在線方法可以更快地獲得結(jié)果，延長設(shè)備的正常運(yùn)行時間，并通過在整個過程中跟蹤結(jié)果形成趨勢來降低整體風(fēng)險(xiǎn)。

清潔驗(yàn)證分析方法通常分為兩類：專屬性分析方法或非專屬性分析方法，并應(yīng)解決各種形式的污染問題。

通過結(jié)合生物負(fù)載、細(xì)菌內(nèi)毒素、TOC和電導(dǎo)率檢測方法，可增強(qiáng)污染控制策略，并最終減少設(shè)備停機(jī)時間

隨著附錄1的修訂，促使人們采取行動以進(jìn)行連續(xù)監(jiān)測并加強(qiáng)對過程的理解，從而向PAT過渡，包括清潔驗(yàn)證旁線監(jiān)測和在線監(jiān)測。分散QC實(shí)驗(yàn)室檢測項(xiàng)目有助于更清楚地了解生產(chǎn)過程。

通過旁線檢測，可以消除從生產(chǎn)車間到QC實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行樣品檢測的過渡時間，旁線檢測是在清潔周期后利用便攜式儀器在生產(chǎn)設(shè)備現(xiàn)場進(jìn)行取樣。消除在QC實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測的需求，避免與質(zhì)量控制工作流程相關(guān)的延遲，最終減少設(shè)備恢復(fù)生產(chǎn)的周轉(zhuǎn)時間并優(yōu)化整體正常運(yùn)行時間。

TOC和電導(dǎo)率旁線檢測允許進(jìn)行擦拭取樣和沖洗取樣。如果已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室建立了清潔驗(yàn)證的TOC方法，則很容易從實(shí)驗(yàn)室過渡到生產(chǎn)車間。

細(xì)菌內(nèi)毒素和生物負(fù)載旁線檢測需要易于使用的儀器，并且可以提供比傳統(tǒng)方法更快的結(jié)果。許多傳統(tǒng)方法，如用于生物負(fù)載檢測的平板計(jì)數(shù)或用于細(xì)菌內(nèi)毒素檢測的96孔板測定，都存在人為誤差風(fēng)險(xiǎn)，因?yàn)樵趥鹘y(tǒng)的生物負(fù)載評估過程中，需要手動計(jì)數(shù)菌落，而細(xì)菌內(nèi)毒素檢測需要數(shù)百個手動移液步驟。這些方法受時間限制，生物負(fù)載通常需要數(shù)天甚至數(shù)周才能獲得結(jié)果。

當(dāng)采用快速微生物方法（RMM）對生物負(fù)載進(jìn)行檢測時，例如使用可以與平板計(jì)數(shù)關(guān)聯(lián)的高通量流式細(xì)胞術(shù)，制藥企業(yè)可以快速做出可行決策，并在一小時內(nèi)獲得結(jié)果。然而，只有某些快速微生物檢測方法能與平板計(jì)數(shù)相關(guān)聯(lián)，因此技術(shù)的選擇對于確保在CCS中簡化采用這些方法非常重要。

Sievers^® Soleil快速微生物檢測儀：45分鐘內(nèi)即可獲得生物負(fù)載檢測結(jié)果并已經(jīng)證實(shí)與平板計(jì)數(shù)法有相關(guān)性

清潔驗(yàn)證取樣模式比較

用于鱟試劑分析的向心微流體技術(shù)是一種更新的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測的創(chuàng)新方法，避免了傳統(tǒng)鱟試劑檢測的痛點(diǎn)，并為內(nèi)毒素的實(shí)時放行檢測提供了途徑。在Sievers^® Eclipse細(xì)菌內(nèi)毒素檢測儀中采用的這項(xiàng)技術(shù)不容易出錯，并大大減少了設(shè)置時間、獲得結(jié)果的時間和動手時間。并且不需要訓(xùn)練有素的微生物學(xué)分析人員，使其可轉(zhuǎn)移到生產(chǎn)車間進(jìn)行。作為CCS的一部分，將向心微流體技術(shù)用于生產(chǎn)區(qū)域旁線檢測或QC檢測，可在生產(chǎn)過程中更早檢測細(xì)菌內(nèi)毒素。該技術(shù)還有助于減少所涉及的時間、業(yè)務(wù)風(fēng)險(xiǎn)以及生產(chǎn)過程的任何潛在風(fēng)險(xiǎn)。

Sievers^® Eclipse細(xì)菌內(nèi)毒素檢測儀：使用向心微流體技術(shù)，鱟試劑的使用量減少90%，且可使用重組試劑

在線清潔驗(yàn)證通過TOC和電導(dǎo)率在線檢測來實(shí)現(xiàn)，并最終能夠加強(qiáng)過程理解、提高效率。TOC和電導(dǎo)率在線監(jiān)測優(yōu)于專屬性分析方法，考慮到高效液相色譜儀（HPLC）、紫外-可見分光光度計(jì)（UV-Vis）或質(zhì)譜儀等儀器的占地面積以及缺乏在線兼容性，因此需要在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行清潔驗(yàn)證。

Sievers^® TOC和電導(dǎo)率分析儀可以集成到原位清洗設(shè)備CIP或原位清洗設(shè)備CIP的組件中，實(shí)現(xiàn)對最終沖洗的在線、實(shí)時取樣。除非另有說明，否則該方法通過旁線檢測或?qū)嶒?yàn)室棉簽樣品檢測來加以補(bǔ)充，但最終基于TOC和電導(dǎo)率沖洗樣品通過既定清潔驗(yàn)證限值，有條件地對設(shè)備實(shí)時放行，允許制藥企業(yè)通過降低設(shè)備停機(jī)時間來優(yōu)化正常運(yùn)行時間。生產(chǎn)需要等待沖洗樣品和棉簽樣品分析結(jié)果合格后才能使設(shè)備返回生產(chǎn)，這就使得在線檢測為消除設(shè)備等待時間提供了可能。

通過采用符合附件1準(zhǔn)則的工藝分析技術(shù)進(jìn)行清潔驗(yàn)證，可以降低風(fēng)險(xiǎn)。TOC、電導(dǎo)率、細(xì)菌內(nèi)毒素和生物負(fù)載的快速檢測方法可用于確保設(shè)備的清潔度，并提高對工藝的了解和控制。通過部署這些污染物的旁線或在線監(jiān)測系統(tǒng)，您可以減少人工操作步驟，更快地檢測到污染，并最大限度地延長設(shè)備正常運(yùn)行時間，避免生產(chǎn)延誤。

如附錄1所述，快速或替代方法和連續(xù)監(jiān)測系統(tǒng)“應(yīng)被考慮以加強(qiáng)產(chǎn)品保護(hù)，使其免受潛在的內(nèi)毒素/熱原、顆粒和微生物污染?！背跃€或在線TOC和電導(dǎo)率檢測外，快速微生物方法（如用于細(xì)菌內(nèi)毒素檢測的微流體技術(shù)和用于生物負(fù)載檢測的流式細(xì)胞術(shù)）的采納和實(shí)施將有助于簡化清潔驗(yàn)證過程并降低風(fēng)險(xiǎn)。這些方法通過評估和管理潛在的質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)來做出可操作的決策和更好地管理設(shè)備，從而有助于污染控制策略。通過更快地獲得檢測結(jié)果和更容易地對過程進(jìn)行監(jiān)控，可以大程度地減少生產(chǎn)或產(chǎn)品放行延誤，從而確保及時向患者提供安全、有效的治療。