01
人血白蛋白是由乙型肝炎疫苗免疫健康人的血漿經(jīng)低溫乙醇蛋白分離法提取并經(jīng)病毒滅活后制成。用于治療因失血、創(chuàng)傷和燒傷引起的休克,腦水腫及大腦損傷所致的腦壓增高,防治低蛋白血癥以及肝硬化或腎病引起的水腫或腹水。蛋白質(zhì)含量是人血白蛋白質(zhì)量評價的重要指標。
常規(guī)的白蛋白含量的測定方法是:血細胞分析儀,雙縮脲比色法,凱氏定氮,紫外光吸收法等方法均需加入試劑,增加反應(yīng)時間,實驗步驟繁多,費時復雜。本方法是根據(jù)不同介質(zhì)的折射率不同的物理特性,通過折射率讀數(shù),計算出蛋白含量。
2010 版中國藥典第三部明確將折光法運用于單份血漿中蛋白質(zhì)含量的測定
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儀器
Abbemat 500 折光儀
樣品
人血白蛋白,免疫球蛋白
試劑
純化水、無水乙醇
測試
過程
1. 開機,調(diào)用方法:Refractive Index。
2. 用純化水(20℃)進行校驗,校驗通過。
3. 配置標準曲線:免疫求蛋白、人血白蛋白
4. 取一小滴樣品,直接放置在棱鏡上,設(shè)置溫度為20℃,等待溫度穩(wěn)定后,按start 鍵進行測量。
5. 測量結(jié)束后,將樣品擦除,并用純化水和無水乙醇分別進行清洗棱鏡。
02 樣品測量結(jié)果
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water check
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2.1 免疫球蛋白標準曲線:
![](https://img50.chem17.com/9/20241129/638684932058203654481.jpg)
2.2 人血白蛋白標準曲線:
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2.3 將標準曲線數(shù)據(jù)用“用戶自定義公式”編輯功
能,保存至儀器內(nèi)。
![](https://img50.chem17.com/9/20241129/638684932061015879815.jpg)
調(diào)用用戶自定義方法圖片
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樣品測量過程圖片
03 結(jié)論
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折光法簡單,準確,快速,可用于蛋白生產(chǎn)制備的中間品和終產(chǎn)品的蛋白含量指控,以指導生產(chǎn)及濃縮,提純等過程。
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Abbemat 折光儀可實現(xiàn) 快速無損的折光率和濃度測量。所有高性能和模塊化系列折光儀在用戶級別、追蹤溯源和數(shù)據(jù)輸出防篡改等方面都符合 21 CFR Part 11 的有關(guān)規(guī)定。Abbemat T-Check 能夠精確校準所有安東帕折光儀的測量棱鏡的表面溫度。
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