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濃度梯度紙條擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)又稱E-試驗(yàn)，是將受試菌株接種于瓊脂平板培養(yǎng)基后加貼E-試驗(yàn)試紙條，孵育培養(yǎng)后根據(jù)說明書進(jìn)行判讀，并按照美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)指南進(jìn)行分析。此法結(jié)合了擴(kuò)散法和稀釋法的原理設(shè)計(jì)的濃度梯度藥敏試驗(yàn)，可進(jìn)行直接定量檢測(cè)?？捎糜诟鞣N常見菌、苛養(yǎng)菌、分枝桿菌、厭氧菌和真菌等的藥敏試驗(yàn)。尤其是酵母菌和霉菌的藥敏試驗(yàn)是一項(xiàng)新的技術(shù)，由于影響因素較多，直接藥敏試驗(yàn)較為困難，E試驗(yàn)法由于結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定，受到廣泛認(rèn)同。
檢測(cè)原理：將MTS藥敏紙條應(yīng)用于接種的瓊脂表面后，預(yù)設(shè)的抗生素梯度會(huì)立即轉(zhuǎn)移到瓊脂基質(zhì)中。培養(yǎng)18小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間后，試驗(yàn)條沿線會(huì)形成對(duì)稱的抑制橢圓，從橢圓與試驗(yàn)條交接處的刻度直接讀取MIC值。
測(cè)試步驟：
1、在打開包裝前，讓封裝達(dá)到室溫以減少冷凝。
2、挑選4至5個(gè)形態(tài)相似的獨(dú)立菌落，用培養(yǎng)基拭子涂抹后懸浮在5毫升的適合懸浮液中。
3、將懸浮液與相應(yīng)的McFarland標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，確保懸浮液的渾濁度。
4、將試驗(yàn)條按照MIC刻度朝上的方式放置在瓊脂表面，并用無菌鑷子壓實(shí)。
結(jié)果評(píng)估：
培養(yǎng)結(jié)束后，在抑制橢圓邊緣與試驗(yàn)條交接的地方讀取MIC值。可以根據(jù)CLSI或EUCAST的標(biāo)準(zhǔn)來解讀MIC值，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分類。
存儲(chǔ)與處理：
未開封的MTS藥敏紙條應(yīng)存放在-20°C~+8℃，部分藥敏紙條需要存放在-20℃；開封后的試驗(yàn)條應(yīng)在2-8°C的密封管中存放不超過7天。
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