細(xì)胞電轉(zhuǎn)參數(shù)的相關(guān)問(wèn)題
是否每一個(gè)細(xì)胞都有特定的參數(shù)?
不是。即使是同一個(gè)細(xì)胞,電轉(zhuǎn)實(shí)際上也沒有單一的參數(shù),需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要的細(xì)胞密度以及溫度和DNA情況加以預(yù)先測(cè)試。
另外,同樣的細(xì)胞在不同的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)條件下可能需要不同的參數(shù),因此本網(wǎng)站有推薦參數(shù)供客戶參考。對(duì)于沒有推薦參數(shù)的細(xì)胞,可以選擇類似直徑的細(xì)胞參數(shù)進(jìn)行測(cè)試。
為什么每次同樣的細(xì)胞進(jìn)行電轉(zhuǎn),有的時(shí)候結(jié)果不一樣?
很多客戶在剛剛接觸電轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候都會(huì)遇到這個(gè)問(wèn)題,因?yàn)橛绊戨娹D(zhuǎn)效果的因素有很多,比如:細(xì)胞密度、溫度、DNA質(zhì)量等。我們都會(huì)建議客戶在首次做一個(gè)新的細(xì)胞電轉(zhuǎn)時(shí)可以從推薦的參數(shù)出發(fā)來(lái)做個(gè)簡(jiǎn)單GFP測(cè)試找到合適的參數(shù)。
初次實(shí)驗(yàn)建議按照推薦電壓上下隔20V測(cè)試,盡量把預(yù)先測(cè)試的實(shí)驗(yàn)條件控制得與正式實(shí)驗(yàn)一致,比如測(cè)試的時(shí)候細(xì)胞密度、培養(yǎng)方式、質(zhì)粒用量等。另外,同樣的細(xì)胞在不同的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)條件下可能需要不同的參數(shù),因此推薦參數(shù)僅供參考。通常GFP熒光在電轉(zhuǎn)1-3個(gè)小時(shí)后可通過(guò)顯微鏡進(jìn)行觀察,過(guò)夜培養(yǎng)后熒光表達(dá)更強(qiáng)。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。